脑型糖原磷酸化酶对胃癌细胞凋亡的影响及机制

• 作者: 袁婷 韦四喜 夏英 夏万松 李红羽 杜洪 金泳 黄海
• 来源期刊: 贵州医科大学学报
• 关键词: 胃肿瘤 糖原磷酸化酶,脑型 RNA干扰 细胞周期 细胞凋亡 活性氧
• 年，卷（期）: 2021,（7）
• 所属期刊栏目: 专题研究
• 页码范围: 751-758
• 页数: 8页
• 分类号: R735.2
• 语种: 中文
• DOI: 10.19367/j.cnki.2096-8388.2021.07.002

摘要

目的 探讨脑型糖原磷酸化酶(PYGB)对胃癌(GC)细胞凋亡的影响及其机制.方法 收集29例初诊GC患者的一般临床资料和GC组织及距肿瘤边缘>5 c m的癌旁组织作为组织标本,同时选取GC细胞系HGC-27、MGC-803、MKN45、AGS及人胃黏膜上皮细胞GES-1作为细胞标本,采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测2种组织和上述5种细胞中PYGB mRNA的表达,采用蛋白印迹法(Western blot)检测各种细胞PYGB蛋白的表达,采用χ2检验分析PYGB mRNA表达与患者临床病理特征的关系;选择PYGB mRNA表达量最高的AGS细胞作后续研究,采用RNA干扰技术根据PYGB基因合成3对siRNA(si-PYGB 1～3)序列,以LipofectamineTM 3000为转染试剂转染胃癌细胞AGS,分为Control组(空白对照)、si-NC组(阴性对照)、si-PYGB 1组(si-PYGB 1)、si-PYGB 2组(si-PYGB 2)和si-PYGB 3组(si-PYGB 3),分别采用RT-qPCR和Western blot检测各组AGS细胞PYGB在mRNA和蛋白水平上的表达;保留干扰效果最好的si-PYGB 2组,采用流式细胞术检测si-NC组和si-PYGB 2组细胞周期、凋亡及细胞内活性氧(ROS)水平.结果 与癌旁组织比较,GC组织中PYGB mRNA水平表达上调(P<0.05);与GES-1比较,GC细胞AGS和MKN45中PYGB mRNA和蛋白水平上表达上调、GC细胞HGC-27和MGC-803中表达下调(P<0.05);与si-NC组比较,si-PYGB 2组AGS细胞S期比例下降、G2/M期比例上升(P<0.05),同时细胞凋亡率上升、细胞内ROS水平增加(P<0.05).结论 沉默PYGB可诱导AGS细胞凋亡,其机制可能与细胞内ROS水平增加有关.