盐酸普鲁卡因通过DNA去甲基化作用抑制结肠癌细胞恶性进展机制研究

• 作者: 刘经纬 李懿诺 刘升 张雨豪 朱波 豆建 李日恒
• 来源期刊: 中国医院药学杂志
• 关键词: 结肠癌 盐酸普鲁卡因 TBX5 DNA去甲基化 增殖 侵袭 迁移 凋亡
• 年，卷（期）: 2021,（12）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 1208-1213,1218
• 页数: 7页
• 分类号: R96
• 语种: 中文
• DOI: 10.13286/j.1001-5213.2021.12.05

摘要

目的:研究盐酸普鲁卡因(procaine hydrochloride,PCA)对结肠癌HCT116、SW480细胞增殖、侵袭、迁移和凋亡等功能表型的影响,探讨PCA在调节抑癌基因TBX5甲基化状态及其表达水平中发挥的作用.方法:采用不同浓度PCA(0.5,1,2,4,8 mmol·L-1)对HCT116、SW480细胞进行不同时间的处理,CCK-8试剂盒检测细胞增殖活性,筛选最佳药物浓度及作用时间;在最佳药物浓度及作用时间下,PCA对人结肠上皮FHC细胞进行处理,CCK-8法检测用药前后FHC细胞活性;平板克隆实验、流式细胞技术、细胞划痕实验、Transwell侵袭实验分别检测PCA对结肠癌细胞增殖活性、凋亡、迁移及侵袭能力的影响;亚硫酸氢盐扩增子测序(BSAS)、qRT-PCR检测PCA作用前后TBX5甲基化状态和表达水平的变化.结果:PCA抑制2种结肠癌细胞的增殖,最佳用药浓度为2 mmol· L-1,最佳用药时间为48 h(P＜0.05).与空白对照组比较,PCA显著抑制2种结肠癌细胞的集落形成能力、迁移能力及侵袭能力且诱导细胞凋亡(P＜0.05).与FHC细胞相比,HCT116、SW480细胞呈现高甲基化状态;与空白对照组相比,PCA处理后HCT116、SW480细胞中TBX5的甲基化程度降低,mRNA表达水平升高,差异有统计学意义(P＜0.05).结论:盐酸普鲁卡因可能通过逆转抑癌基因TBX5甲基化,提高其表达水平从而抑制结肠癌细胞增殖、迁移和侵袭等恶性进展.