猪非典型瘟病毒和盖塔病毒双重RT-PCR方法的建立与应用

• 作者: 关铜 岳健国 聂民财 李风琴 杜佩珊 杨姝 徐志文 朱玲
• 来源期刊: 中国兽医科学
• 关键词: 猪非典型瘟病毒 盖塔病毒 双重RT-PCR
• 年，卷（期）: 2021,（2）
• 所属期刊栏目: 预防兽医学
• 页码范围: 153-160
• 页数: 8页
• 分类号: S852.659.6
• 语种: 中文
• DOI: 10.16656/j.issn.1673-4696.2021.0032

摘要

为快速准确地检测出猪非典型瘟病毒(APPV)与盖塔病毒(GETV),根据GenBank中公布的AP-PV NS3基因和GETV NSP3基因序列,选择APPV NS3基因和GETV NSP3基因的保守序列,各设计并合成了1对特异性引物.通过优化反应体系和反应条件,最终建立可以同时扩增出500和810 bp特异性片段的双重RT-PCR.该方法对猪圆环病毒2型、猪瘟病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒以及猪流行性腹泻病毒的扩增结果均为阴性.对APPV和GETV重组质粒的最低检出量分别为187和126 copies/μL并具有高重复性.应用本方法检测从四川自贡市、泸州市等地采集的38份仔猪肌肉震颤样本,结果显示,APPV、GETV的阳性率分别为13.16％和7.89％,与单一RT-PCR方法对APPV和GETV的检出率完全一致.本研究中成功建立的APPV、GETV双重RT-PCR方法为APPV和GETV的快速检测提供了技术手段,有助于仔猪先天性震颤的临床诊断和流行病学调杏,对于公共卫生也有一定意义.