沉默MyD88抑制NF-κB p65活化对TNF-α诱导的心肌细胞凋亡和炎症损伤的保护作用

• 作者: 王成 金卫东 郭长磊 李霞 刘振 韩明磊 侯永兰 崔佳佳
• 来源期刊: 现代免疫学
• 关键词: 心肌炎症 肿瘤坏死因子α 髓样分化因子88 核因子κB
• 年，卷（期）: 2021,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 204-209
• 页数: 6页
• 分类号: R714.252
• 语种: 中文

摘要

为探究沉默髓样分化因子88(myeloid differentiation factor 88,MyD88)抑制NF-κB p65活化对TNF-α诱导的心肌细胞凋亡和炎症损伤的影响,采用TNF-α处理心肌细胞,将其随机分为4组:Control组、TNF-α组、TNF-α+shRNA-NC组和TNF-α+sh-MyyD88组.Western blotting检测心肌细胞MyD88蛋白表达水平及NF-κB p65磷酸化情况;ELISA检测细胞培养上清液肌酸激酶同工酶MB(creatine kinase MB,CK-MB)、肌红蛋白(myohemoglobin,Mb)和肌钙蛋白Ⅰ(cardiac troponin Ⅰ,cTn Ⅰ)及IL-1β、iNOS、IL-6、IL-10水平;FACS检测心肌细胞凋亡情况;5-溴脱氧尿嘧啶核苷(5-bromo-2'-deoxyuridine,BrdU)染色检测心肌细胞增殖情况;RT-PCR检测Ki67、Bcl-2、Bax、c-Myyc mRNA表达水平.结果表明,与TNF-α+shRNA-NC 组比较,TNF-α+sh-MyyD88 组 MyD88蛋白表达水平显著降低(P＜0.05);CK-MB、Mb 和 cTnⅠ 水平显著降低(均P＜0.05);心肌细胞凋亡率显著降低(P＜0.05);BrdU染色阳性细胞数显著增多(P＜0.05);Ki67、c-Myc mRNA 水平和 Bcl-2 mRNA/Bax mRNA 比值显著升高(均 P＜0.05);IL-1β、iNOS、IL-6水平显著降低(均 P＜0.05),IL-10水平显著升高(P＜0.05);p-p65/p65比值显著降低(P＜0.05).以上结果说明,沉默MyD88抑制NF-κB p65的活化对TNF-α诱导的心肌细胞损伤具有保护作用.