直流电场对人脂肪间充质干细胞增殖和干细胞生物学特性的影响

• 作者: 刘兰 刘星可 刘梦嫦 谢德富 颜洪
• 来源期刊: 第三军医大学学报
• 关键词: 直流电场 干细胞 细胞增殖 脂肪间充质干细胞
• 年，卷（期）: 2021,（11）
• 所属期刊栏目: 专题报道:皮肤创面与瘢痕修复研究|Monographic Reports:Studies on skin wound and scar repair
• 页码范围: 1010-1017
• 页数: 8页
• 分类号: R312|R329.21|R329.28
• 语种: 中文
• DOI: 10.16016/j.1000-5404.202101054

摘要

目的 探讨直流电场对体外培养的人脂肪间充质干细胞(human adipose-derived stem cells,hASCs)增殖的影响.方法 将手术中获得的脂肪组织采用酶原消化法制备hASCs,待细胞培养传代至第三代接种于6孔板内,24 h后进行以下处理:①分别给予0(未刺激组)、50、100、150、200 mV/mm直流电场刺激,刺激频率为1 h/d,连续刺激3d.在倒置显微镜下观察细胞的形态及生长特点.收集各实验组细胞进行细胞计数、CCK-8实验检测细胞的增殖情况.②通过流式细胞仪分析直流电场刺激对hASCs干细胞表型标志CD105、CD73、CD90、CD14、CD34、CD31、CD45表达的影响.③诱导分化检测直流电场刺激对hASCs分化能力的影响.④蛋白免疫印迹检测刺激组和未刺激组(0 mV/mm)细胞增殖相关通路蛋白的表达.结果 50、100、150 mV/mm细胞的增殖率和光密度值明显高于未刺激组(P均＜0.01).当直流电场的刺激强度增加到200 mV/mm时细胞的增殖率明显低于未刺激组(P＜0.001),而细胞的光密度值高于未刺激组(P＜0.05).直流电场刺激前后hASCs均高表达CD105、CD73、CD90,低表达CD14、CD31、CD34、CD45.且直流电场刺激前后hASCs均能分化为骨细胞和脂肪细胞,但刺激组的分化速度较未刺激组快.刺激组细胞增殖相关蛋白p-ERK1/2表达高于未刺激组(P＜0.01).结论 直流电场可能通过调控ERK的磷酸化促进人脂肪间充质干细胞的增殖,并且不改变其干细胞生物学特性.