无乳链球菌和海豚链球菌早期预警分子检测

• 作者: 崔淼 吴敏 刘茹 黎晶晶 张辉杰 许德麟 张其中
• 来源期刊: 水产科学
• 关键词: 罗非鱼 无乳链球菌 海豚链球菌 早期预警 分子检测
• 年，卷（期）: 2021,（4）
• 所属期刊栏目: 研究与应用|Research and Application
• 页码范围: 589-595
• 页数: 7页
• 分类号: S917.1
• 语种: 中文
• DOI: 10.16378/j.cnki.1003-1111.19191

摘要

为提高罗非鱼链球菌病发前的早期预警,根据海豚链球菌的16S rRNA基因的部分序列和无乳链球菌的Sip基因特异性序列,分别合成特异性检测引物,经过对反应体系和反应条件的优化,建立检测较低含量的无乳链球菌和海豚链球菌的分子技术.试验结果显示,所建立的双重PCR可扩增出870 bp无乳链球菌和614 bp海豚链球菌的特异性片段,而迟钝爱德华氏菌、维氏气单胞菌、创伤弧菌、温和气单胞菌、溶藻弧菌、大肠杆菌均为阴性;无乳链球菌和海豚链球菌基因组DNA最低检测量分别为9.84×10-5 ng/μL和9.30×10-5 ng/μL,菌液最低检测量分别为2.76×103 cfu/mL和2.51×103 cf u/m L,远低于其半致死密度107 cf u/m L;对无乳链球菌和海豚链球菌混合感染的模拟临床样品的检出率为100％.研究结果表明,该分子技术的特异性较强、灵敏度较高、检出率较高,可用于较低含量的无乳链球菌和海豚链球菌的快速鉴别,为罗非鱼链球菌的早期预警分子检测提供技术支持.