低分子肝素介导TLR4/MyD88/NF-κB通路保护PC12细胞拮抗氧糖剥夺诱导的炎症反应

• 作者: 理国富 陈奡 邓旺斌 张咏康 郭燕萍 马达 陈卓 梁远
• 来源期刊: 中国医师杂志
• 关键词: 肝素，低分子量 TLR4信号通路 再灌注损伤 PC12细胞 炎症反应
• 年，卷（期）: 2021,（6）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 848-852,858
• 页数: 6页
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.cn431274-20200915-01288

摘要

目的:探讨低分子肝素(LMWH)对氧糖剥夺(OGD)诱导的PC12细胞炎症反应的影响及相关机制。方法:体外培养神经细胞株PC12，随机分为Sham(对照)组、OGD组、LMWH组及阻断剂组，其中阻断剂组又分为：Eritoran+OGD组、LMWH+Eritoran+OGD组、ST2825+OGD组、LMWH+ST2825+OGD组、吡咯烷二硫代氨基甲酸铵(PDTC)+OGD组及LMWH+PDTC+OGD组；建立OGD细胞模型，应用CCK-8法检测细胞活力，应用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和Western blot法检测Toll样受体4(TLR4)、MyD88和核因子κB(NF-κB)的mRNA和蛋白表达情况，ELISA法检测IL-1β、IL-6、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和S100β的浓度变化。结果:OGD组第1、2、3天的细胞活性较Sham组明显降低( P<0.05)，LMWH处理后，可显著提高PC12细胞OGD后第2、3天的细胞活性( P<0.05)，但较Sham组低。与Sham组相比，OGD组中TLR4、MyD88及NF-κB的mRNA表达量明显升高( F＝144.9，710.5，79.51， P<0.01)，当用LMWH处理后三种物质mRNA表达量下降，与OGD组比较差异均有统计学意义( P<0.01)，且TLR4/MyD88/NF-κB通路的特异性阻断剂Eritoran、ST2825、PDTC均可强化LMWH的抗炎作用。TLR4、MyD88及NF-κB的蛋白表达量同基因相一致。OGD组IL-1β、IL-6、TNF-α和S100β的表达显著高于Sham组( P<0.05)；LMWH组其表达被抑制，与OGD组比较差异均有统计学意义( P<0.05)，应用Eritoran、ST2825和PDTC分别阻断TLR4、MyD88和NF-κB，炎症因子和S100β的浓度明显降低，但仍高于Sham组( P<0.05)。 结论:OGD会导致PC12细胞病理性损伤，S100β含量增多，炎症反应加重；应用LMWH可以改善细胞活性，下调炎症反应程度，对细胞有保护作用，同时使用TLR4/MyD88/NF-κB通路各个环节的抑制剂后，OGD上调炎症因子的作用皆被不同程度地抑制，提示LMWH可能通过TLR4/MyD88/NF-κB通路调节OGD诱导的PC12细胞的炎症反应。