不同细胞标记物对大鼠牙髓干细胞体外标记的生物学影响

• 作者: 谢娜 姬小婷 李子夏 唐成芳 陆磊 王丹杨
• 来源期刊: 山西医科大学学报
• 关键词: 牙髓干细胞 细胞标记 CM-DiI DAPI 大鼠
• 年，卷（期）: 2021,（6）
• 所属期刊栏目: 基础医学|Basic Medicine
• 页码范围: 735-740
• 页数: 6页
• 分类号: R329.2
• 语种: 中文
• DOI: 10.13753/j.issn.1007-6611.2021.06.013

摘要

目的 通过体外实验,对比氯甲基苯甲酰氨(CM-DiI)和4',6-二脒基-2-苯基吲哚(DAPI)这两种不同细胞标记物对大鼠牙髓干细胞生物学性能的影响,为需要进行细胞标记的实验研究提供理论参考依据.方法 采用酶解组织块法培养大鼠牙髓细胞并对其进行纯化,通过免疫组化鉴定细胞来源,并进行细胞体外多向诱导分化能力实验.利用5μg/ml浓度的CM-DiI和DAPI对第3代大鼠牙髓干细胞进行体外标记,通过比较细胞增殖情况以及细胞乳酸脱氢酶释放率,评价标记后细胞生物学状态.结果 利用酶解组织块法可获得克隆集落状生长的大鼠牙髓细胞.免疫组化法确定细胞为间充质来源,且具有向脂肪细胞、成骨细胞以及成牙本质细胞分化的潜能.CM-DiI标记后细胞膜及核膜均呈现出红色荧光,DAPI则细胞核蓝染.与未进行细胞标记比较,CM-DiI和DAPI标记后细胞形态、上清液乳酸脱氢酶含量及CCK-8值均无明显变化,两组差异无统计学意义.结论 CM-DiI和DAPI操作简便、染色速度快,都可用于标记大鼠牙髓干细胞.相较DAPI而言,CM-DiI对大鼠牙髓干细胞的细胞毒性更小.