二甲双胍对高尿酸诱导HepG2细胞脂质沉积的作用及其机制研究

• 作者: 谭璐嫔 唐凤 韩萍萍 向光大 张军霞
• 来源期刊: 中华糖尿病杂志
• 关键词: 二甲双胍 尿酸 肝细胞 线粒体氧化应激 代谢相关脂肪性肝病
• 年，卷（期）: 2021,（6）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 618-625
• 页数: 8页
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.cn115791-20210107-00009

摘要

目的:探讨二甲双胍对高尿酸诱导HepG2脂质沉积的作用及其可能机制。方法:将HepG2细胞按照不同处理因素分为5组：对照组（不干预）、高尿酸组（12 mg/dl尿酸）、高尿酸+二甲双胍组（12 mg/dl尿酸+10 μmol/L二甲双胍）、高尿酸+二甲双胍+单磷酸腺苷酸活化的蛋白激酶（AMPK）抑制剂组（10 μmol/L AMPK特异性抑制剂Compound C预处理30 min 后，再加12 mg/dl尿酸+10 μmol/L二甲双胍）和高尿酸+二甲双胍+烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶4（NOX4）抑制剂组（100 μmol/L NOX4特异性抑制剂Apocynin预处理30 min后，再加12 mg/dl尿酸+10 μmol/L二甲双胍），每组设置3个平行组。培养48 h后，油红“O”检测细胞脂滴分布，试剂盒检测细胞甘油三酯（TG）含量、线粒体内活性氧簇（ROS）和丙二醛（MDA）含量、黄嘌呤氧化酶（XO）和谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活性，实时聚合酶链反应检测细胞脂质合成相关基因的mRNA及线粒体NOX4 mRNA水平，Western blot检测细胞AMPK、p-AMPK及线粒体NOX4蛋白水平，免疫荧光检测线粒体内NOX4分布。组间比较采用单因素方差分析和 t检验。 结果:与高尿酸组相比，高尿酸+二甲双胍组HepG2细胞内脂滴数量减少，TG含量明显减少（ t=8.181， P<0.05），线粒体ROS、MDA水平及XO活性降低，GSH-Px活性增加（ t=5.472~8.242，均 P<0.05），脂质合成相关基因mRNA表达降低（ t=7.835~11.013，均 P<0.05），AMPK蛋白的磷酸化水平显著增加（ t=7.000， P<0.05），线粒体NOX4的mRNA及蛋白表达明显下调（ t=6.190、14.199， P<0.05），差异均具有统计学意义。与高尿酸+二甲双胍组相比，高尿酸+二甲双胍+AMPK抑制剂组的上述作用减弱，高尿酸+二甲双胍+NOX4抑制剂组的上述作用增强，差异具有统计学意义（均 P<0.05）。 结论:二甲双胍可以减少高尿酸诱导的HepG2细胞脂质沉积，其机制与激活AMPK/NOX4信号通路、改善线粒体氧化应激有关。