CYP2J2介导生成的EETs通过PPARγ促进胰腺导管腺癌铁死亡抵抗

• 作者: 陶芃作 蒋玉娥 王海 高戈
• 来源期刊: 中南大学学报（医学版）
• 关键词: 胰腺导管腺癌 环氧二十碳三烯酸 细胞色素P4502J2 铁死亡 PANC-1
• 年，卷（期）: 2021,（9）
• 所属期刊栏目: 论著|Articles
• 页码范围: 932-941
• 页数: 10页
• 语种: 中文
• DOI: 10.11817/j.issn.1672-7347.2021.210413

摘要

目的:胰腺导管腺癌是消化系统的恶性肿瘤,预后差,复发率高.最新研究表明铁死亡抵抗是胰腺导管腺癌的病理机制之一,但发生铁死亡抵抗的潜在机制尚未阐明.细胞色素P4502J2(CYP2J2)是人体组织细胞中介导花生四烯酸生成环氧二十碳三烯酸(epoxyeicosatrienoic acids,EETs)的关键酶.研究显示EETs参与肿瘤的发生发展,然而EETs在胰腺导管腺癌中的作用及其对铁死亡的影响尚不清楚.本研究探讨CYP2J2及EETs对铁死亡诱导剂erastin诱导的胰腺导管腺癌铁死亡的影响及其机制.方法:收集9例胰腺导管癌患者的肿瘤组织及相应的癌旁组织,采用real-time PCR和蛋白质印迹法检测CYP2J2表达,酶联免疫吸附实验(ELISA)法检测8,9-EET分解产物8,9-碳三烯酸(8,9-dihydroxyeicosatrienoic acids,8,9-DHET)的含量.体外实验以人胰腺导管腺癌细胞系PANC-1为研究对象,采用erastin诱导铁死亡,检测细胞内长链脂酰辅酶A合成酶4(acyl-CoA synthetase 4,ACSL4)的蛋白质水平、乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)活性、丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量、Fe2+浓度及细胞存活状况.给予8,9-EET预处理,观察其对erastin诱导的PANC-1细胞铁死亡的影响.采用慢病毒构建CYP2J2敲低的细胞系,观察其对erastin诱导的PANC-1细胞铁死亡的影响.采用过氧化物酶体增殖激活受体γ(peroxisome proliferation-activated receptorγ,PPARγ)阻断剂处理,观察其对8,9-EET调节erastin诱导的PANC-1细胞谷胱甘肽过氧化物酶4(glutathione peroxidase 4,GPX4)和MDA含量的影响.结果:CYP2J2在胰腺导管腺癌组织中高表达,其下游代谢产物8,9-DHET水平亦显著升高.8,9-EET预处理显著减少erastin诱导的PANC-1细胞铁死亡,同时降低PANC-1细胞中Fe2+浓度、LDH活性、MDA含量及ACSL4蛋白质表达.此外,8,9-EET可部分恢复膜铁转运蛋白(ferroportin,FPN)和铁死亡抑制蛋白(ferroptosis suppressor protein 1,FSP1)的基因表达.shCYP2J2能够加剧erastin诱导的PANC-1细胞铁死亡,下调FPN和FSP1的基因表达.GPX4的表达,该效应可被PPARγ阻断剂GW9662消除.结论:CYP2J2/EETs高表达于胰腺导管腺癌组织,EETs通过激活PPARγ上调GPX4的水平,抑制铁死亡,从而促进胰腺导管腺癌铁死亡抵抗.