激活BMP信号的骨细胞对骨髓基质细胞成骨及成脂分化的作用研究

• 作者: 赵怡心 曾继涛 涂小林 刘宏
• 来源期刊: 中国骨质疏松杂志
• 关键词: 骨形态发生蛋白 成骨分化 Wnt 成脂分化
• 年，卷（期）: 2021,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 694-698,708
• 页数: 6页
• 分类号: R322.71|R329.28|R977.6
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1006-7108.2021.05.014

摘要

目的 激活骨细胞系MLO-Y4细胞中BMP信号检测培养上清对骨髓基质细胞系ST2成骨、成脂分化的影响,进一步探讨其机制.方法 0.5‰DMSO,0.5μmol/L BMP激动剂FK506分别处理MLO-Y424 h后,使用CCK-8检测细胞活力变化,实时荧光定量PCR检测BMP下游靶基因ID1及ID2 mRNA表达变化;用20％MLO-Y4培养上清与80％新鲜培养基混合后培养ST2细胞,分为DMSO组、FK506组.碱性磷酸酶染色代表其成骨分化能力,通过实时荧光定量PCR检测碱性磷酸酶(ALP)、骨钙蛋白(OCN)、骨唾液酸蛋白(BSP)、Runx2等成骨细胞标志基因,过氧化物酶体增殖剂激活受体γ(PPARγ)和C/EBP成脂分化标志基因.免疫印迹试验(Western blotting)检测ST2细胞内Wnt信号下游β-catenin、BMP信号下游p-smad5蛋白表达水平.结果 与DMSO作用的MLO-Y4细胞相比,FK506激动的MLOY4细胞内BMP信号靶基因ID1、ID2上调,但不影响细胞活力.FK506组ST2细胞同DMSO组对比,成骨分化相关标志物,包括ALP、OCN、BSP、Runx2(P<0.001)均显著升高;成脂分化标志物PPARγ及C/EBP表达则显著降低(P<0.001);ST2细胞内β-catenin蛋白表达量上调(P<0.05).结论 BMP信号激动后MLO-Y4细胞上清可以促进ST2细胞成骨分化、抑制成脂分化,其成骨能力增强与细胞内Wnt信号增强有关.