SIRT3-FoxO1通路在H9c2心肌细胞缺血损伤中的作用

• 作者: 苏冬 林先和
• 来源期刊: 医学研究生学报
• 关键词: SIRT3 FoxO1 自噬 凋亡 心肌缺血
• 年，卷（期）: 2021,（8）
• 所属期刊栏目: 基础研究|Basic Research
• 页码范围: 802-806
• 页数: 5页
• 分类号: R542.2
• 语种: 中文
• DOI: 10.16571/j.cnki.1008-8199.2021.08.004

摘要

目的 心肌缺血时细胞内自噬与凋亡都会发生复杂的变化.文中旨在探究SIRT3-FoxO1通路对H9c2心肌细胞缺血损伤的影响.方法 以H9c2大鼠心肌细胞为研究对象,用慢病毒构建过表达SIRT3稳定细胞株,用SIRT3选择性抑制剂3-TYP处理过表达SIRT3细胞,建立细胞缺血缺氧实验模型.实验分为4组:对照组(正常H9c2细胞长满后换高糖DMEM培养基,并放入正常培养箱中培养)、缺血缺氧组(正常H9c2细胞长满后换无糖DMEM培养基,并放入缺氧培养箱中培养)、过表达SIRT3+缺血缺氧组(过表达SIRT3细胞长满后换无糖DMEM培养基,并放入缺氧培养箱中培养)、过表达SIRT3+3-TYP+缺血缺氧组(过表达SIRT3细胞用3-TYP预处理后换无糖DMEM培养基,并放入缺氧培养箱中培养).使用流式荧光细胞术检测细胞凋亡情况,全自动生化仪检测乳酸脱氢酶(LDH)释放情况,Western blot法检测SIRT3、乙酰化FoxO1、自噬相关蛋白LC3B、Beclin1、凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2的表达情况.结果 过表达SIRT3+缺血缺氧组LDH释放量[(58.67±5.13)U/L]、对照组LDH释放量[(28.33±8.50)U/L]较缺血缺氧组[(118.00±19.70)U/L]明显降低(P<0.05),过表达SIRT3+3-TYP+缺血缺氧组LDH释放量[(95.33±13.05)U/L]较过表达SIRT3+缺血缺氧组明显升高(P<0.01).过表达SIRT3+缺血缺氧组、对照组细胞凋亡Bax蛋白表达较缺血缺氧组明显降低(P<0.01),过表达SIRT3+3-TYP+缺血缺氧组较过表达SIRT3+缺血缺氧组明显升高(P<0.01).过表达SIRT3+缺血缺氧组、对照组SIRT3、Bcl-2蛋白表达较缺血缺氧组明显增加(P<0.05),乙酰化FoxO1蛋白表达明显减少(P<0.05).过表达SIRT3+3-TYP+缺血缺氧组乙酰化FoxO1蛋白表达较过表达SIRT3+缺血缺氧组明显增加(P<0.05),LC3B、Beclin1蛋白表达较过表达SIRT3+缺血缺氧组明显减少(P<0.05).过表达SIRT3+缺血缺氧组LC3B蛋白、Beclin1蛋白表达较缺血缺氧组明显增加(P<0.05).结论 SIRT3的激活对H9c2细胞缺血损伤具有保护作用,并通过SIRT3-FoxO1信号通路来介导.