肽基脯氨酰顺反异构酶1对喉癌细胞系Hep-2细胞生物学行为的影响

• 作者: 王辉 李章富 温行 刘剑利 李福才
• 来源期刊: 中国医科大学学报
• 关键词: 肽基脯氨酰顺反异构酶1 喉癌细胞系 生物学行为
• 年，卷（期）: 2021,（8）
• 所属期刊栏目: 论著|Original article
• 页码范围: 681-689
• 页数: 9页
• 分类号: R394
• 语种: 中文
• DOI: 10.12007/j.issn.0258-4646.2021.08.003

摘要

目的 探讨肽基脯氨酰顺反异构酶1(Pin1)对喉癌细胞系Hep-2细胞中心体扩增以及生物学行为的影响.方法 培养人喉癌细胞系Hep-2细胞,构建、转染Pin1 siRNA并分组.Pin1过表达分为转染pcDNA3.1组(NC组)、转染pcDNA3.1-Pin1组(Pin1组)、转染pcDNA3.1-Pin1后加核转录因子(NF-κB/p65)抑制剂(BAY11-7082)组(Pin1+7082组).Pin1干扰分为转染阴性对照组(NC组)、转染siRNA组(Si-Pin1组)、转染siRNA后加NF-κB/p65激活剂(IL-1β)组(Si-Pin1+IL-1β组).Western blotting检测Pin1、CDK2及NF-κB/p65蛋白表达,实时PCR检测Pin1及CDK2基因表达,免疫荧光实验检测细胞中心体扩增及NF-κB/p65核转位,流式细胞仪检测Hep-2细胞周期、凋亡、克隆形成,CCK-8实验检测Hep-2细胞增殖能力,Transwell及划痕实验检测Hep-2细胞的迁移能力.结果 Pin1过表达促进中心体复制异常、克隆形成、细胞迁移、细胞周期G1/S转化,NF-κB/p65核转位以及CDK2的表达;NF-κB/p65抑制剂能够减弱这些效应.下调Pin1表达能够抑制中心体异常复制、克隆形成、细胞迁移、细胞周期G1/S的转化,NF-κB/p65入核以及CDK2的表达;NF-κB/p65激活剂能够逆转这些作用.结论 Pin1可能经NF-κB通路上调CDK2的表达来影响Hep-2细胞的生物学行为.