体外培养SD大鼠关节软骨细胞原代至第3代的形态学特点

• 作者: 刘保一 刘家河 杨佳慧 杨帆 覃开蓉 赵德伟
• 来源期刊: 中国组织工程研究
• 学科: 医学
• 关键词: 软骨细胞 酶消化法 细胞培养 大鼠 实验
• 年，卷（期）: 2021,（14）
• 所属期刊栏目: 软骨组织构建
• 页码范围: 2161-2165
• 页数: 5页
• 分类号: R446|R496|R318
• 语种: 中文

摘要

背景:常用的获得软骨细胞的方法有机械-酶消化法、链霉蛋白酶和胶原酶序贯消化法、胰蛋白酶和Ⅱ型胶原蛋白酶序贯消化法以及单纯Ⅱ型胶原蛋白酶消化法.目的:探讨SD大鼠膝关节软骨细胞Ⅱ型胶原酶体外分离、提取、鉴定方法,观察原代至第3代软骨细胞的形态学特点.方法:课题组采用一步酶消化法(Ⅱ型胶原酶)体外分离、提取、培养SD大鼠膝关节软骨细胞并进行传代培养,进而构建其体外培养体系.使用细胞增殖实验、倒置相差显微镜观察细胞组织学形态;甲苯胺蓝染色、Ⅱ型胶原与蛋白聚糖免疫荧光染色等方法进行细胞性状鉴定.实验经大连大学附属中山医院伦理委员会批准.结果 与结论:①镜下观察与细胞增殖实验均显示第2,3代细胞形态、增殖能力最佳,后逐渐退化;②甲苯胺蓝染色、Ⅱ型胶原与蛋白聚糖免疫荧光染色等组织学检测显示,第3代体外培养软骨细胞状态功能良好;③结果表明,一步酶消化法(Ⅱ型胶原酶)能够成功地从SD大鼠膝关节标本中分离出软骨细胞并且可以进行传代培养;体外培养3代后软骨细胞去分化特性逐渐增强,第3代体外培养软骨细胞性状良好,可用于实验研究.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	赵德伟		195	1625	21.0	29.0
2	刘保一		24	103	6.0	9.0
3	杨帆		15	34	3.0	5.0
4	刘家河		1	0	0.0	0.0
5	杨佳慧		2	0	0.0	0.0
6	覃开蓉		2	0	0.0	0.0