矽肺早期炎症中环状RNA氮6-腺苷酸甲基化修饰差异

• 作者: 罗薇 王莎 李永琪 王静 杨少奇 巢杰
• 来源期刊: 中华劳动卫生职业病杂志
• 关键词: 巨噬细胞 二氧化硅 矽肺早期炎症 氮6-腺苷酸甲基化修饰 环状RNA
• 年，卷（期）: 2021,（12）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 899-902
• 页数: 4页
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.cn121094-20210312-00141

摘要

目的:探究矽肺早期炎症中环状RNA（circRNA）的氮6-腺苷酸甲基化修饰（m6A）差异，分析circRNA参与矽肺进程的分子机制。方法:体外培养人单核细胞系（THP-1）诱导的巨噬细胞，蛋白免疫印迹法（Western blot）检测巨噬细胞活化标志物，细胞计数试剂盒8（CCK8）法检测细胞活力，确定二氧化硅（SiO 2）刺激浓度。比色法测定矽肺模型中总RNA的m6A甲基化修饰变化，检测m6A甲基化酶、去甲基酶和阅读蛋白表达情况。Arraystar m6A-circRNA表观转录组芯片检测二氧化硅模型组和对照组小鼠肺组织中m6A修饰差异表达的circRNA，并用荧光实时定量PCR（RT-qPCR）验证遴选出高表达circRNA。 结果:SiO 2浓度为50 μg/cm 2时对THP-1诱导的巨噬细胞活化标志物和细胞活性影响最为明显（ P<0.05）。与对照组比较，SiO 2引起小鼠原代巨噬细胞和THP-1诱导的巨噬细胞总RNA的m6A水平升高，甲基化酶METTL3和阅读蛋白YTDHF3表达量明显升高，差异均有统计学意义（ P<0.05）。与对照组比较，矽肺模型小鼠肺中132个circRNA的m6A甲基化修饰水平升高，296个circ RNA的m6A甲基化修饰水平下降，基于基础表达量筛选得到靶标-circSLC2A13；SiO 2引起巨噬细胞中circSLC2A13的表达和m6A化修饰明显升高（ P<0.05）。 结论:矽肺早期炎症阶段存在RNA的m6A甲基化修饰异常现象，其中circSLC2A13的m6A甲基化修饰参与矽肺早期炎症中巨噬细胞的激活。