附子多糖调控miR-135b-5p对脂多糖诱导血管平滑肌细胞增殖和迁移的影响

• 作者: 刘雪琼 黄会芳
• 来源期刊: 中成药
• 关键词: 附子多糖 miR-135b-5p 脂多糖 血管平滑肌细胞 增殖 迁移
• 年，卷（期）: 2021,（5）
• 所属期刊栏目: 药理
• 页码范围: 1180-1185
• 页数: 6页
• 分类号: R285.5
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1001-1528.2021.05.012

摘要

目的 探讨附子多糖对脂多糖(LPS)诱导血管平滑肌细胞增殖和转移的影响及分子机制.方法 将血管平滑肌细胞分为对照组(未经任何处理)、模型组(10 μg/mLLPS)、附子多糖-1、2、3实验组(2.5、5、10 ng/mL附子多糖和10 μg/mL LPS)、阳性对照组(10 μmol/L辛伐他汀和10 μg/mL LPS)、miR-NC组(转染miR-135b-5p阴性对照质粒载体)、miR-135b-5p组(转染miR-135b-5p过表达载体)、附子多糖-3+miR-NC组(转染miR-135b-5p阴性对照质粒载体+10 ng/mL附子多糖+10 μg/mL LPS)、附子多糖-3+miR-135b-5p组(转染miR-135b-5p过表达载体+10 ng/mL附子多糖+10μg/mLLPS).蛋白质印迹(Western blot)法检测细胞增殖核抗原Ki67(Ki67)、神经钙黏蛋白(N-cadherin)、上皮钙黏蛋白(E-cadherin)蛋白表达;流式细胞仪检测细胞周期;细胞计数试剂盒8(CCK-8)检测细胞活性;Transwell检测细胞迁移;实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测miR-135b-5p蛋白表达.结果 LPS可诱导的血管平滑肌细胞增殖和迁移,附子多糖处理后Ki67、N-cadherin蛋白表达降低,E-cadherin蛋白表达升高,细胞活性降低,迁移细胞数降低,G0/G1期细胞占比升高,S期细胞占比降低(P＜0.01),G2/M期细胞占比无统计学差异(P＞0.05),miR-135b-5p蛋白表达降低(P＜0.01).过表达miR-135b-5p促进LPS诱导的血管平滑肌细胞增殖和迁移.且过表达miR-135b-5p逆转了附子多糖对LPS诱导的血管平滑肌细胞增殖、迁移的抑制作用.结论 附子多糖可通过下调miR-135b-5p抑制脂多糖诱导的血管平滑肌细胞增殖和转移.