龙眼DlWRKY57基因克隆与拟南芥遗传转化

• 作者: 黄幸 丁峰 潘介春 张树伟 徐炯志 王金英 李琳 王颖 李浩然 刘一
• 来源期刊: 分子植物育种
• 关键词: 龙眼(Dimocarpus longan) DlWRKY57 基因克隆 超表达载体构建
• 年，卷（期）: 2021,（1）
• 所属期刊栏目: 基因工程育种|Genetic Engineering Breeding
• 页码范围: 149-157
• 页数: 9页
• 语种: 中文
• DOI: 10.13271/j.mpb.019.000149

摘要

以龙眼成熟叶片为材料,利用实验室构建的龙眼转录组数据库,筛选出DlWRKY57基因cDNA序列,对其开放阅读框(ORF)进行克隆和生物信息学分析.结果表明,DlWRKY57基因ORF长度为894bp,编码297个氨基酸,此蛋白属于WRKY基因家族中的Ⅱa类,存在1个WRKY结合位点.通过生物信息学分析表明,该蛋白属于非跨膜亲水蛋白,预测定位于细胞核,存在45个氨基酸磷酸化位点.其二级结构由无规则卷曲、α-螺旋和延伸链构成,其中无规则卷曲为二级结构中最主要的结构元件,并且二级结构与三级结构预测结果高度一致.同源基因进化树分析表明该基因与木薯亲缘关系最近.以pMD18-T和pBI121载体为基础,成功构建了植物超表达载体pBI121-D1WRKY57,利用农杆菌花序法转化拟南芥,经PCR分子检测,获得含DlWRKY57基因的拟南芥植株,该超表达载体的遗传转化为DlWRKY57基因功能的深入研究提供依据.