表皮生长因子受体基因沉默介导酪氨酸激酶/信号转导与转录激活因子信号通路对胶质瘤细胞凋亡的调控机制

• 作者: 焦克平 包丽娟 陈恒三 赵玉梅
• 来源期刊: 中华实验外科杂志
• 关键词: 表皮生长因子受体基因 酪氨酸激酶/信号转导与转录激活因子信号通路 胶质瘤 增殖 凋亡
• 年，卷（期）: 2021,（9）
• 所属期刊栏目: 神经外科
• 页码范围: 1654-1658
• 页数: 5页
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.cn421213-20210104-01101

摘要

目的:探讨表皮生长因子受体(EGFR)基因介导酪氨酸激酶(JAK)/信号转导与转录激活因子(STAT)信号通路对胶质瘤细胞凋亡的调控机制。方法:收集甘肃省人民医院2017年1月至2019年6月胶质瘤患者手术切除的胶质瘤组织及瘤旁组织。细胞进行细胞分组与转染，分成7组：Blank组、NC组、oe-EGFR组、小干扰RNA(siRNA)-EGFR组、Gefitinib组、NSC 228155组和siRNA-EGFR+NSC 228155组。实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)和蛋白质印迹法(Western blot)法检测胶质瘤组织和转染后各组细胞中EGFR、JAK1、STAT3、B细胞淋巴瘤/白血病-2(bcl-2)和bcl-2相关X蛋白(bax) mRNA和蛋白的表达。噻唑蓝(MTT)法和流式细胞术分别检测各组细胞转染后细胞增殖与凋亡。两组间比较采用Student’s t检验，多组间比较应用单因素方差分析。 结果:胶质瘤组织中的EGFR、JAK1、STAT3、bcl-2 mRNA(EGFR： t＝13.630， P<0.01；JAK1： t＝16.650， P<0.01；STAT3： t＝17.420， P<0.01；bcl-2： t＝17.010， P<0.01)和蛋白(EGFR： t＝15.590， P<0.01；JAK1： t＝11.680， P<0.01；STAT3： t＝9.295， P<0.01；bcl-2： t＝13.960， P<0.01)表达量显著高于癌旁组织，而Bax mRNA( t＝21.480， P<0.01)和蛋白( t＝10.950， P<0.01)表达量显著低于癌旁组织，差异有统计学意义(均 P<0.05)。Blank组和NC组组间差异无统计学意义(均 P>0.05)；siRNA-EGFR组和Gefitinib组Bax mRNA( F＝48.300， P<0.01)和蛋白( F＝28.330， P<0.01)表达量显著高于NC组，而EGFR、JAK1、STAT3、bcl-2 mRNA(EGFR： F＝138.000， P<0.01；JAK1： F＝234.300， P<0.01；STAT3： F＝106.300， P<0.01；bcl-2： F＝186.500， P<0.01)和蛋白(EGFR： F＝63.540， P<0.01；JAK1： F＝61.720， P<0.01；STAT3： F＝54.660， P<0.01；bcl-2： F＝77.480， P<0.01)表达量显著低于NC组，细胞增殖能力明显低于NC组(24 h： F＝23.650， P<0.01；48 h： F＝44.450， P<0.01；72 h： F＝32.160， P<0.01)，而细胞凋亡明显高于NC组( F＝50.810， P<0.01)，差异有统计学意义(均 P<0.05)；oe-EGFR组和NSC 228155组各因子和指标趋势逆转，差异有统计学意义(均 P<0.05)；而siRNA-EGFR+NSC 228155组各因子和指标与NC组相比差异无统计学意义(均 P>0.05)。 结论:沉默EGFR表达，抑制JAK/STAT信号通路的激活，有助于抑制胶质瘤细胞增殖，并促进细胞凋亡。