胃癌细胞Cullin1基因表达与上皮-间充质转化的关系

• 作者: 杨沛刚 田园 檀碧波 丁平安 郭洪海 刘洋 张泽 李勇 赵群
• 来源期刊: 中华实验外科杂志
• 关键词: 胃癌 Cullin1 基因干扰 上皮-间充质转化
• 年，卷（期）: 2021,（10）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 1926-1930
• 页数: 5页
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.cn421213-20201106-00815

摘要

目的:检测Cullin1基因在胃癌组织和细胞株中的表达，并探讨其参与肿瘤上皮-间充质转化(EMT)的机制。方法:选取2020年1月至2020年3月于河北医科大学第四医院行胃癌根治术12例患者离体标本癌及癌旁组织，应用实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)和蛋白质印迹法(Western blot)技术分别检测12例胃癌与配对癌旁组织中Cullin1 mRNA和蛋白的表达；合成抑制内源性Cullin1表达的小干扰RNA(siRNA)转染胃癌细胞为实验组，非特异性siRNA转染(NS-siRNA)为对照组；用噻唑蓝(MTT)实验检测肿瘤细胞的增殖活性；应用划痕实验及Transwell小室侵袭实验检测细胞的侵袭迁移能力；通过RT-qPCR及Western blot检测转染前后细胞中EMT相关基因E-钙黏蛋白(E-cadherin)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)、锌指转录因子(Snail)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的表达。组间比较采用 t检验或 χ2检验。 结果:胃癌组织中Cullin1 mRNA和蛋白的表达水平高于癌旁正常组织(4.19±0.50比1.19±0.28， t＝-0.583， P<0.05；0.99±0.07比0.40±0.11， t＝16.102， P<0.05)。MTT显示转染细胞48 h后，Cullin1-siRNA组细胞活性低于NS-siRNA组和空白组(0.55±0.06比1.16±0.10， t＝1.061， P<0.05；0.55±0.06比1.22±0.10， t＝13.963， P<0.05)。Cullin1-siRNA转染后细胞的侵袭能力低于NS-siRNA组和空白组(39.17±2.23比83.67±5.79， F＝720.65， P<0.05；39.17±2.23比88.00±4.29， F＝115.34， P<0.05)；Cullin1-siRNA组细胞迁移能力低于NS-siRNA组和空白组[(0.50±0.09) mm比(0.91±0.05) mm， t＝-10.064， P<0.05；(0.50±0.09) mm比(0.89±0.07) mm， t＝-8.369， P<0.05]。Cullin1-siRNA转染后SGC7901细胞后EMT相关基因N-cadherin、Snail、MMP-9表达均低于空白组表达(1.04±0.05比0.55±0.04， t＝10.845， P<0.05；1.05±0.07比0.44±0.04， t＝10.493， P<0.05；1.04±0.05比0.37±0.03， t＝15.882， P<0.05)。 结论:Cullin1基因可能通过调节部分EMT基因而促进了胃癌侵袭转移。