水蛭素对高糖环境下足细胞顶膜区蛋白的影响

• 作者: 郭倩 陈志强 方敬 徐晶 韩森福 李欣蕊 赵春智
• 来源期刊: 中华中医药杂志
• 关键词: 糖尿病肾病 水蛭素 高糖 足细胞 Podocalyxin GLEPP1
• 年，卷（期）: 2021,（5）
• 所属期刊栏目: 论著|Treatise
• 页码范围: 2494-2498
• 页数: 5页
• 语种: 中文

摘要

目的:观察水蛭素对体外高糖环境下足细胞顶膜区蛋白的影响,探索其对足细胞的保护作用及可能的作用机制.方法:条件性永生化小鼠足细胞在33℃/γ-IFN存在条件下,细胞增殖;37℃/无γ-IFN条件下,细胞分化.免疫细胞化学法鉴定分化成熟的细胞核是否表达足细胞特异性蛋白WT-1.MTT法筛选最佳药物浓度.将分化后足细胞分为正常糖组(含D-葡萄糖5.5mmol/L)、高糖组(含D-葡萄糖30mmol/L)、高渗组(含D-葡萄糖5.5mmol/L+D-甘露醇24.5mmol/L)和高糖加最佳浓度水蛭素组,分别干预24、48、72h,免疫细胞化学法、Real-time PCR、Western Blot检测足细胞顶膜区podocalyxin、GLEPP1表达.结果:鉴定结果显示分化成熟的细胞核表达足细胞特异性蛋白WT-1.MTT法筛选最佳水蛭素浓度为10-5mol/L.免疫细胞化学结果显示podocalyxin、GLEPP1均表达于足细胞膜,与高糖组比较,高糖加水蛭素组podocalyxin、GLEPP1表达有所增加.与同时间点高糖组比较,高糖加水蛭素组各时间点podocalyxin mRNA和GLEPP1蛋白表达均显著增加(P＜0.01),高糖加水蛭素组72h后GLEPP1 mRNA表达显著增加(P＜0.05).高糖加水蛭素组48、72h后podocalyxin蛋白表达显著增加(P＜0.05).结论:水蛭素能增加高糖环境下足细胞顶膜区podocalyxin、GLEPP1表达,从而保护足细胞,维持肾小球滤过屏障结构和功能的完整性,这可能对减少糖尿病肾病尿蛋白、延缓肾脏病进展具有一定的作用.