6-姜酮酚抑制肝内胆管癌细胞的增殖、迁移、侵袭作用及其机制探讨

• 作者: 陈泽昊 朱文杰 申兵兵 江建新
• 学科: 农学
• 关键词: 肝内胆管癌 STAT3转录因子 6-姜酮酚 细胞增殖 肿瘤侵润
• 年，卷（期）: 2022,（4）
• 所属期刊栏目: 肝脏肿瘤
• 页码范围: 857-864
• 页数: 7页
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1001-5256.2022.04.022

摘要

目的 研究6-姜酮酚(6-Paradol)对人肝内胆管癌细胞增殖、迁移、侵袭的作用及机制。方法 人肝内胆管癌细胞系HCCC 9810和HUCCT1以不同浓度的6-Paradol及等体积的DMSO(对照组)处理后，采用CCK-8、平板克隆、划痕愈合及Transwell实验检测其增殖、迁移及侵袭能力。应用生物信息学软件Swiss Target Prediction预测6-Paradol作用的蛋白靶点，采用Western blot检测胆管癌细胞中STAT3、p-STAT3、SRC、p-mTOR、p21、Bcl-2以及p53的蛋白表达水平；采用药物亲和反应实验(DARTS)探究6-Paradol与STAT3的相互作用；胆管癌HCCC 9810和HUCCT1细胞分别转染STAT3过表达质粒或sh-p21质粒后，qRT-PCR检测各组细胞中STAT3和p21的mRNA水平，Western blot检测STAT3和p21的蛋白表达量；CCK-8、划痕愈合及Transwell实验检测各组细胞增殖及迁移侵袭能力。计量资料两组间比较采用t检验；多组间比较采用方差分析，进一步两两比较采用LSD-t检验。结果 与对照组相比，6-Paradol处理组中各组细胞的增殖、迁移、侵袭能力明显减弱(P值均<0.05)。6-Paradol处理组细胞中STAT3、p-STAT3的表达水平较对照组显著下调(P值均<0.05)，p21的表达水平显著增加(P值均<0.05)，而Bcl-2、SRC和p-mTOR的表达水平无明显变化(P值均>0.05)。6-Paradol处理组中STAT3被蛋白酶水解的比例分别减少了4866%、45.33%(t值分别为16.64、8.76，P值均<0.05)；分别转染STAT3过表达质粒及沉默p21质粒后，胆管癌细胞中STAT3mRNA水平均显著增加(tHCCC9810=2.82，tHUCCT1=5.60，P值均<0.05)，p21mRNA水平均显著降低(tHCCC9810=6.84，tHUCCT1=3.91，P值均<0.05)。CCK-8结果提示6-Paradol作用48h及72h后HCCC9810细胞和HUCCT1细胞中STAT3过表达组的增殖率较单独给药组显著提高，p21沉默组增殖率较单独给药组也明显提高(P值均<0.05)。划痕愈合实验结果提示在过表达STAT3或沉默p21的HCCC9810及HUCCT1细胞中，与单独给药组相比划痕愈合率明显提升(P值均<0.05)。Transwell实验结果表明，在过表达STAT3或者沉默p21表达的HCCC9810及HUCCT1细胞中，与单独给药组相比迁移率均明显提升(P值均<0.05)；在过表达STAT3或沉默p21表达的HCCC9810及HUCCT1细胞中，与单独给药组相比侵袭率均显著提升(P值均<0.05)。结论 6-Paradol通过靶向作用于STAT3-p21通路抑制胆管癌细胞的增殖、迁移和侵袭。