miR-140靶向抑制PD-L1逆转胃癌间充质干细胞诱导的胃癌细胞免疫微环境中生存

• 作者: 陈爱香 杨青山 陆林 柳明杰
• 来源期刊: 现代免疫学
• 学科: 医学
• 关键词: 胃癌间充质干细胞 程序性死亡受体-配体1 外周血单个核细胞
• 年，卷（期）: 2022,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 7-14,49
• 页数: 9页
• 分类号: R196.42
• 语种: 中文

摘要

为探讨上调miR-140表达的胃癌间充质干细胞(gastric cancer mesenchymal stem cell,GC-MSC)对胃癌细胞免疫微环境中生存的影响并探讨其机制,以贴壁细胞培养法分别从胃癌组织及癌旁组织中分离GC-MSC及胃间充质干细胞(gastric mesenchymal stem cell,GMSC).qRT-PCR 检测 GC-MSC 及 GMSC 中 miR-140的差异表达;通过 miR-140模拟物(miR-140 mimics)上调GC-MSC中miR-140的表达,CCK8法及FACS检测GC-MSC诱导的HGC-27细胞生存及凋亡情况,ELISA检测miR-140 mimics转染GC-MSC干预HGC-27细胞诱导PBMC分泌炎性因子的变化;以qRT-PCR及Western blotting检测miR-140 mimics/GC-MSC干预下胃癌HGC-27细胞PD-L1及PD-1表达水平的变化;双荧光素酶报告基因实验验证miR-140与PD-L1直接靶向调控关系.结果显示,miR-140在GC-MSC中的表达量显著低于GMSC(P＜0.001);上调miR-140(表达量提高至约9倍,转染效率＞85％)后GC-MSC可显著抑制胃癌细胞的存活率,促进其凋亡(均P＜0.05);上调miR-140表达能够使GC-MSC诱导的胃癌细胞在免疫微环境中的生存受到抑制(均P＜0.05);上调GC-MSC中miR-140表达对胃癌细胞诱导下PBMC分泌细胞因子发挥促进作用(均P＜0.05).上调miR-140表达的GC-MSC能显著下调HGC-27细胞PD-L1及PD-1的表达(均P＜0.001),且miR-140与PD-L1存在靶向互作关系(P＜0.001).由此,上调miR-140表达靶向抑制PD-L1 逆转GC-MSC诱导的胃癌细胞生存促进及凋亡抵抗.