miR-9通过调控β-tubulin Ⅲ、GFAP对神经干细胞增殖的影响

• 作者: 王煜 赵岚 阚伯红 史慧妍
• 来源期刊: 安徽医科大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 神经干细胞 神经退化性疾病 胶质细胞 分化
• 年，卷（期）: 2022,（1）
• 所属期刊栏目: 基础医学研究
• 页码范围: 10-14
• 页数: 5页
• 分类号: R338
• 语种: 中文
• DOI: 10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2022.01.003

摘要

目的 探究miR-9是否通过调控β-微管蛋白-Ⅲ(β-tubulinⅢ)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)影响神经干细胞(NSCs)的增殖.方法 对健康孕鼠进行NSCs分离培养并将分离出的细胞均分为NO组(无转染NSCs细胞株)、NN组(NSCs转染miR-9-NC)、NM组(NSCs转染miR-9 mimics)、NI组(转染miR-9 inhibitor).通过免疫荧光鉴定巢蛋白(Nestin),qRT-PCR法检测miR-9、β-tubulinⅢ、GFAP含量,MTT法检测NSCs增殖情况,流式细胞术检测NSCs凋亡情况,Western blot检测miR-9、β-tubulinⅢ、GFAP蛋白表达.结果 Nestin在90％的NSCs中呈现阳性,且与细胞核共定位,提示NSCs分离成功.NM组NSCs中miR-9 mRNA表达量在四组中最高,说明转染成功.四组中NM组β-tubulinⅢmRNA、蛋白表达量最高,GFAP mRNA和蛋白表达量最低,NI组与之相反(P<0.05).24 h后四组中NM组NSCs活性最强且呈现随时间延长而逐渐增强的趋势(P<0.05),NI组的细胞活性较其他三组减弱(P<0.05).四组中NM组细胞凋亡率少于其他三组(P<0.05),NI组的细胞凋亡率较其他三组升高(P<0.05),NO组与NN组细胞上述指标差异无统计学意义.结论 过表达miR-9通过促进β-tubulinⅢ表达、抑制GFAP表达,从而促进NSCs增殖.