miR-219-5p对人肾癌细胞增殖和迁移、侵袭的影响及其作用机制

• 作者: 王晓燕 冯景见 何英霞 李康 李鑫
• 来源期刊: 南昌大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: miR-219-5p NIMA相关激酶6 肾癌 增殖 迁移 侵袭 作用机制
• 年，卷（期）: 2022,（1）
• 所属期刊栏目: 基础医学
• 页码范围: 24-31,47
• 页数: 9页
• 分类号: R737.11
• 语种: 中文
• DOI: 10.13764/j.cnki.ncdm.2022.01.005

摘要

目的 探讨微小RNA-219-5 p(miR-219-5 p)对人肾癌细胞增殖、迁移、侵袭的影响及其作用机制.方法 采用实时荧光定量PCR(qPCR)和蛋白质印迹法(Western blot)检测miR-219-5p和NIMA相关激酶6(NEK6)蛋白在肾癌组织和肾癌细胞786-O、ACHN中的表达.建立过表达miR-219-5p的细胞,观察其对肾癌细胞786-O、ACHN增殖、迁移和侵袭的影响.生物信息学预测结合双荧光素酶报告实验分析miR-219-5 p与NEK6的靶向关系.在786-O、ACHN细胞中转染si-NEK6,噻唑蓝(MTT)和细胞克隆实验检测细胞存活和克隆数,Transwell检测细胞迁移和侵袭,Western blot检测细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)、P21、E-钙黏蛋白(E-cadherin)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、NEK6蛋白表达.共转染miR-219-5p和pcDNA3.1-NEK6,观察过表达NEK6对miR-219-5p诱导的786-O和ACHN细胞增殖、迁移和侵袭的影响.结果 与癌旁组织或肾上皮细胞比较,肾癌组织或肾癌细胞786-O、ACHN中miR-219-5p表达量明显减少,NEK6蛋白表达量显著增加(P<0.05).过表达miR-219-5p明显减低786-O、ACHN细胞存活率、克隆数、迁移细胞数、侵袭细胞数、Cyclin D1、MMP-2蛋白表达量,提高P21、E-cadherin蛋白水平(P<0.05).miR-219-5p靶向调控NEK6表达.抑制NEK6明显减少786-O、ACHN细胞中NEK6、Cyc-lin D1、MMP-2蛋白表达量、细胞存活率、克隆数、迁移细胞数和侵袭细胞数,显著提高P21、E-cadherin蛋白水平(P<0.05).过表达NEK6逆转了miR-219-5p对786-O、ACHN细胞增殖、迁移、侵袭、Cyclin D1、MMP-2蛋白表达的抑制作用,以及逆转了其对P21、E-cadherin蛋白表达的促进作用.结论 miR-219-5 p通过靶向调控NEK6表达抑制肾癌细胞的增殖、迁移和侵袭.