过表达/干扰表达miR-122对HBV稳转优势单克隆株HepGA14表达功能的影响

• 作者: 郑世榜 李永强 廖思娜 邱华 廖小莉
• 来源期刊: 广西医科大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 微小RNA-122 乙型肝炎病毒 乙肝标志物 稳转 优势单克隆株
• 年，卷（期）: 2022,（1）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 28-33
• 页数: 6页
• 分类号: R373
• 语种: 中文
• DOI: 10.16190/j.cnki.45-1211/r.2022.01.005

摘要

目的:采用miR-122过表达/干扰表达慢病毒质粒干预HBV稳转优势单克隆株HepGA14,观察其乙肝表面抗原(HB-sAg)、乙肝e抗原(HBeAg)、乙肝病毒DNA (HBV DNA)表达功能的变化.方法:构建miR-122过表达和干扰表达慢病毒质粒,以最佳感染复数MOI值侵染HBV全基因组1.3倍体HBV稳转优势单克隆株HepGA14(对照组),分别命名为HepGA14-VL1044(miR122过表达组)和HepGA 14-VL 1043 (miR 122干扰组).qPCR检测HepG2和HepGA14中的中miR-122的表达情况.ELISA分别检测3组细胞中上清HBsAg和HBeAg表达量,qPCR检测3组细胞的HBV DNA和miR-122表达水平.结果:最佳MOI值为30.与对照组比较,过表达miR-122慢病毒质粒侵染HepGA14后可上调优势细胞株内miR-122表达量,下调HBV DNA复制活性及HBsAg、 HBeAg的表达量;干扰miR-122表达后,可上调HepGA14的HBV DNA复制活性及HBsAg、HBeAg的表达量,差异均有统计学意义(均P＜0.0001).结论:成功构建miR-122慢病毒过表达/干扰载体,并建立稳定过表达/干扰miR-122的HepGA14细胞系;miR-122可调控HBsAg、HBeAg、HBV-DNA的表达水平.