LHX3基因调控Sonic hedgehog信号通路影响原发性肝癌发生和发展的研究

• 作者: 李荣军 游忠岚 徐春霞 王健 杨小丽 向洪志 杨伟兴
• 来源期刊: 国际消化病杂志
• 关键词: 肝癌 LHX3 Sonic hedgehog信号通路 肿瘤生长
• 年，卷（期）: 2022,（2）
• 所属期刊栏目: 论著|Original Articles
• 页码范围: 97-104
• 页数: 8页
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-534X.2022.02.007

摘要

目的 探究LHX3基因在原发性肝癌(以下简称肝癌)发生和发展中的作用及机制.方法 收集2017年1月至2019年1月在泸州市中医医院接受手术治疗的54例肝癌患者的肿瘤组织及癌旁组织(距肿瘤边缘>3 cm),采用免疫组织化学染色法检测组织中LHX3表达水平.将HepG2细胞随机分为空白对照组(正常培养细胞)、NC-shRNA组(转染阴性对照NC-shRNA慢病毒质粒)、LHX3-shRNA组(转染LHX3-shRNA慢病毒质粒)和LHX3-shRNA+Pur组(转染LHX3-shRNA慢病毒质粒后用Purmorphamine试剂处理24 h).采用实时荧光定量PCR(real-time qPCR)和蛋白质印迹法(Western blotting)检测细胞中LHX3表达水平,Western blotting法检测Sonic hedgehog(Shh)信号通路相关蛋白Shh、Gli-l的表达,CCK-8法检测细胞增殖能力,Transwell实验检测细胞侵袭和迁移能力.选取30只SPF级雌性BALB/c裸鼠随机分为对照组、NC-shRNA组和LHX3-shRNA组,分别接种空白对照组、NC-shRNA组和LHX3-shRNA组HepG2细胞,以构建移植瘤裸鼠模型.在接种后第21天处死裸鼠,采用H-E、TUNEL染色法观察各组肿瘤组织的病理变化,免疫组织化学染色法检测Gli-l表达,Western blotting法检测Shh、Gli-l蛋白表达.结果 肝癌患者肿瘤组织中LHX3阳性表达率较癌旁组织显著升高(P<0.05).与空白对照组比较,沉默LHX3表达的LHX3-shRNA组HepG2细胞中LHX3 mRNA和蛋白相对表达量均显著下降(P均<0.05),Shh、Gli-l蛋白相对表达量均显著下降(P<0.05),细胞增殖能力显著减弱(P<0.05),细胞侵袭数量与迁移数量均显著减少(P均<0.05).与LHX3-shRNA组比较,LHX3-shRNA+Pur组细胞的增殖能力显著增强(P<0.05),细胞侵袭数量与迁移数量均显著增加(P均<0.05).与对照组比较,LHX3-shRNA组裸鼠肿瘤组织体积显著减小、湿重显著降低(P均<0.05),肿瘤组织细胞密度降低,细胞凋亡率显著升高(P<0.05),Shh和Gli-l蛋白相对表达量均显著下降(P均<0.05),Gli-l蛋白阳性表达率显著下降(P<0.05).结论 LHX3在肝癌组织中呈高表达,沉默LHX3表达可抑制HepG2细胞的增殖、侵袭和迁移,并可抑制肿瘤生长,其机制可能与调控Shh信号通路有关.