维生素D通过下调谷氨酰胺合成酶抑制乳腺癌细胞增殖

• 作者: 袁惠玲 吴丽华 陈桂林 黄珂铭
• 来源期刊: 标记免疫分析与临床
• 学科: 医学
• 关键词: 维生素D 三阴性乳腺癌 维生素受体 谷氨酰胺合成酶 细胞增殖
• 年，卷（期）: 2022,（1）
• 所属期刊栏目: 基础研究|Basic Research
• 页码范围: 145-152
• 页数: 8页
• 分类号: Q565|R737.9
• 语种: 中文
• DOI: 10.11748/bjmy.issn.1006-1703.2022.01.029

摘要

目的 探究维生素D对非三阴性乳腺癌(non-triple negative breast cancer,Non-TNBC)和TNBC癌细胞增殖的影响及分子机制.方法 收集TNBC和Non-TNBC患者乳腺组织,原代培养TNBC和Non-TNBC患者乳腺细胞;免疫荧光检测乳腺细胞雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)和HER2蛋白表达;免疫荧光检测Non-TNBC和TNBC乳腺癌组织和乳腺细胞中VDR蛋白表达;CCK-8检测细胞活力变化;流式细胞术检测细胞增殖和细胞周期的变化;光学比色法检测细胞谷氨酰胺合成酶(glutamine synthetase,GS)活力的变化;ELISA检测细胞培养上清和胞内谷氨酰胺的水平;Western blot检测细胞GS和VDR蛋白表达的变化;CHIP-PCR检测VDR对GS的转录调控.结果 TNBC患者外周血中维生素D水平和癌组织VDR蛋白表达明显低于Non-TNBC患者(P<0.05).相比于原代Non-TNBC乳腺癌细胞,原代TNBC患者乳腺癌细胞低表达雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)和HER2蛋白表达;TNBC乳腺癌细胞VDR表达水平明显低于Non-TNBC乳腺癌细胞(P<0.05);VD(10-7～10-4 mol/L)可明显剂量依赖性的抑制Non-TNBC乳腺癌细胞和TNBC乳腺癌细胞细胞活力(P<0.05).相比于0mol/L VD组,103 mol/L的VD组Non-TNBC乳腺癌细胞和TNBC乳腺癌细胞细胞增殖比例明显减少(P<0.05);相比于0mol/L VD组,103 mol/L的VD组Non-TNBC乳腺癌细胞G1/G0期细胞比例明显减少(P<0.05);103 mol/L的VD组TNBC乳腺癌细胞G1/G0期细胞比例明显减少,S期细胞比例明显增加(P<0.05);相比于0mol/L VD组,103 mol/L的VD组Non-TNBC和TNBC乳腺癌细胞谷氨酰胺合成酶活力、谷氨酰胺合成酶蛋白、细胞内和细胞外谷氨酰胺水平表达比例明显减少(P<0.05);相比于0mol/L VD组,103 mol/L的VD组Non-TNBC乳腺癌细胞和TNBC乳腺癌细胞VDR蛋白表达明显增加(P<0.05);103 mol/L的VD组TNBC乳腺癌细胞VDR可转录调控GS基因转录(P<0.05).结论 维生素D通过下调谷氨酰胺合成酶抑制乳腺癌细胞增殖.