碳水化合物结合域CBM3对外切葡聚糖酶性质的影响

• 作者: 胡艳梅 周姗娜 乔琦茗 李华南 江正兵
• 来源期刊: 湖北大学学报（自然科学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: 碳水化合物结合域 外切葡聚糖酶 催化活性 酶学性质
• 年，卷（期）: 2022,（2）
• 所属期刊栏目: 基因表达与蛋白质功能研究专栏
• 页码范围: 131-136
• 页数: 6页
• 分类号: Q556|Q789
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-2375.2021.00.015

摘要

纤维素酶与底物的可及性是酶水解的主要限制因素之一.碳水化合物结合域(CBM)可以提高纤维素酶与底物的可及性,从而促进纤维素酶的酶促水解.本研究探究外源的CBM对外切葡聚糖酶(CBH)性质的影响.我们将一个外源的CBM3与CBH进行融合,并在毕赤酵母(Pichia pastoris)X33中成功表达,得到了CBM3-CBH和CBH的纯酶.比较两者对于微晶纤维素(Avicel)的结合能力和酶学性质.结果显示CBM3-CBH对Avicel的结合能力比CBH高8％,但是两者对不同底物的催化活性无显著差异.两者的最适反应温度均为60℃,最适反应pH均为6.结果表明,外源的CBM虽然能在一定程度上提高CBH对底物的结合能力,但对CBH的酶学性质没有实质性影响.本研究为探究CBM在纤维素酶催化过程中的作用机制奠定了良好的基础.