miRNA-6516-5p通过靶向ODC1调控肾癌细胞的增殖和迁移

• 作者: 黄耿 桂定文 徐祖伟 付金伦 罗帅 赵云飞 万京桦
• 来源期刊: 国际外科学杂志
• 关键词: 肾肿瘤 miR-6516-5p 鸟氨酸脱羧酶1 细胞增殖 细胞迁移
• 年，卷（期）: 2022,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 194-198,C3
• 页数: 6页
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.cn115396-20210601-00200

摘要

目的:探讨微小RNA(miRNA)-6516-5p在肾癌细胞系中的表达及调控肾癌细胞增殖和迁移的分子机制。方法:用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测肾癌细胞系和正常近端肾小管上皮细胞系中miR-6516-5p的表达。用脂质体法分别将miR-6516-5p模拟物和无意义序列(NC)瞬时转染至miR-6516-5p表达最低的肾癌细胞，即miR-6516-5p组和NC组。qRT-PCR检测转染细胞miR-6516-5p的表达。CCK-8法和Transwell迁移实验检测转染细胞的增殖和迁移。生物信息学软件和双荧光素酶基因报告实验分别预测和验证miR-6516-5p对靶基因的调控。qRT-PCR和Western blotting法分别检测转染细胞中靶基因的表达。计量资料以均数±标准差( ± s)表示，两组间比较采用 t检验，多组间比较采用单因素方差分析。 结果:miR-6516-5p在肾癌细胞系中的表达均明显低于正常近端肾小管上皮细胞( P<0.01)，786-O细胞中miR-6516-5p的表达最低( F＝27.69， P<0.01)。NC组和miR-6516-5p组786-O细胞中miR-6516-5p的表达分别为1.01±0.08和9.91±1.16，与NC组比较，miR-6516-5p组786-O细胞中miR-6516-5p表达明显增加( t＝7.63， P<0.01)。上调miR-6516-5p能显著抑制786-O细胞的增殖( P<0.05)。NC组和miR-6516-5p组细胞迁移数分别为(85.65±8.77)个和(28.05±6.20)个，过表达miR-6516-5p可抑制786-O细胞的迁移( t＝5.36， P<0.01)。miR-6516-5p的靶基因可能是鸟氨酸脱羧酶1( ODC1)，miR-6516-5p能显著抑制野生型ODC1-3′UTR的荧光素酶活性( t＝9.83， P<0.01)。上调miR-6516-5p可降低786-O细胞中ODC1 mRNA和蛋白的表达( P<0.01)。 结论:miR-6516-5p在肾癌细胞系中表达降低，miR-6516-5p通过靶向ODC1抑制肾癌786-O细胞的增殖和迁移，miR-6516-5p可能成为肾癌潜在的分子靶点。