联合策略优化犬α干扰素的酵母表达

• 作者: 李丁 李兰 安允飞 毕振威 于晓明 陈瑾 郑其升
• 来源期刊: 中国生物工程杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: 犬α干扰素 毕赤酵母 重组蛋白产量 多拷贝 分子伴侣
• 年，卷（期）: 2022,（1）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 88-95
• 页数: 8页
• 分类号: Q819
• 语种: 中文
• DOI: 10.13523/j.cb.2107010

摘要

前期研究在毕赤酵母中分泌表达了犬α干扰素(CaIFN),其活性较高但产量未达到理想水平.目前工作的重点是提高重组蛋白产量.构建含有1、2、4、6、8拷贝CaIFN基因的酵母转化子,其中KM-6CaIFN产量最高,与KM-1CaIFN相比提高了200.6％.共表达8种分子伴侣,其中Hac蛋白能够提高KM-6CaIFN和KM-8CaIFN的目的蛋白产量,提高幅度分别为32.1％和113.1％.在此基础上继续增加CaIFN拷贝数,可观察到KM-12CaIFN-Hac的产量最高,是KM-8CaIFN-Hac的1.33倍,同时是KM-1CaIFN的5.61倍.通过与梯度稀释的BSA进行蛋白质条带比较,评估KM-12CaIFN-Hac的靶蛋白产量约为581 mg/L,为目前报道中酵母产犬α干扰素最高值.