黄芪多糖通过抑制钙蛋白酶1/NF-κB信号通路减轻低氧诱导的肺动脉高压小鼠肺炎症反应和纤维化

• 作者: 刘欢 邓海艳 田小雪 孙鹤宁 刘晓健 王洪新
• 来源期刊: 中国药理学与毒理学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 黄芪多糖 钙蛋白酶1 肺动脉高压 肺纤维化 肺炎症
• 年，卷（期）: 2022,（2）
• 所属期刊栏目: 论著|ORIGINAL ARTICLES
• 页码范围: 98-107
• 页数: 10页
• 分类号: R285
• 语种: 中文
• DOI: 10.3867/j.issn.1000-3002.2022.02.003

摘要

目的 探讨黄芪多糖(APS)对低氧诱导的肺动脉高压(PAH)模型小鼠产生的肺炎症和纤维化的保护作用及机制.方法 ①体内实验:采用低氧舱(10％O2,90％N2)内饲养C57BL/6小鼠制备肺动脉高压模型.雄性野生型C57BL/6小鼠分为正常对照组、低氧模型组、模型+APS 200和400 mg·kg-1组(每日ig给予)、模型+BAY11-70825 mg·kg-1组(NF-κB抑制剂,ip给予,每周3次);钙蛋白酶1敲除(Capn1 EK684 FN-/-)雄性小鼠分为敲除对照组和敲除低氧组;28 d后,测定右心室压(RVSP)和右心室肥厚指数(RVHI);HE染色观察肺组织病理形态并检测血管壁厚度比(WTR)和血管壁面积比(WAR);Masson染色观察肺组织胶原纤维沉积;ELISA检测血清白细胞介素1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平及肺组织中羟脯氨酸(HYP)水平;Western印迹法检测肺组织钙蛋白酶1、基质金属蛋白酶9(MMP-9)和转化生长因子β1(TGF-β1)蛋白表达水平以及NF-κB P65蛋白磷酸化水平.② 体外实验:原代培养肺动脉平滑肌细胞(PASMC)分为细胞对照组、低氧组、低氧+APS 0.6 g·L-1、低氧+BAY11-708210μmol?L-1和低氧+MDL-28170(钙蛋白酶1抑制剂)10μmol?L-1组.除细胞对照组外,其余组加药后直接置低氧培养箱(3％O2、97％N2)培养24 h;CCK-8法检测细胞存活率;ELISA检测细胞中IL-1β和TNF-α水平;Western印迹法检测细胞钙蛋白酶1、MMP-9和TGF-β1蛋白表达水平以及NF-κB P65蛋白磷酸化水平.结果 ①体内实验:与野生型正常对照组比较,低氧模型组小鼠RVSP、RVHI、WAR、WTR、肺组织胶原纤维沉积面积、小鼠血清中IL-1β和TNF-α水平、肺组织中HYP水平、钙蛋白酶1、MMP-9、TGF-β1蛋白表达水平及NF-κB P65磷酸化水平显著升高(P<0.05);与低氧模型组相比,模型+APS组、敲除低氧组和模型+BAY11-7082组小鼠的RVSP、RVHI、WAR、WTR、肺组织胶原纤维沉积面积、血清中IL-1β和TNF-α水平、肺组织中HYP水平、钙蛋白酶1、MMP-9和TGF-β1蛋白表达水平及NF-κB P65磷酸化水平显著降低(P<0.05).②体外实验:与细胞对照组相比,低氧组细胞存活率、细胞中IL-1β和TNF-α水平、钙蛋白酶1、MMP-9、TGF-β1蛋白表达水平及NF-κB P65磷酸化水平显著升高(P<0.05);与低氧组相比,低氧+APS组、低氧+BAY11-7082组、低氧+MDL-28170组细胞存活率、细胞中IL-1β和TNF-α水平、钙蛋白酶1、MMP-9、TGF-β1蛋白表达水平及NF-κB P65磷酸化水平显著降低(P<0.05).结论 APS对低氧诱导的小鼠PAH具有改善作用,可通过抑制钙蛋白酶1/NF-κB信号通路减轻肺组织炎症反应和纤维化反应.