转铁蛋白受体1对结核分枝杆菌胞内生存影响的初步研究

• 作者: 李军丽 姜爱国 付丽丽 占玲俊 赵爱华
• 来源期刊: 医学研究杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 转铁蛋白受体 铁代谢 结核分枝杆菌
• 年，卷（期）: 2022,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 69-74
• 页数: 6页
• 分类号: R378
• 语种: 中文
• DOI: 10.11969/j.issn.1673-548X.2022.03.015

摘要

目的 研究宿主铁元素吸收相关转铁蛋白受体1(transferrin receptor,TfR1)对结核分枝杆菌(Mycobacterium tubercu-losis,M.tb)胞内生存的影响,探讨其成为抗结核新靶点的可能.方法 采用免疫组化和蛋白质免疫印迹技术对不同剂量铁过载小鼠以及M.tb感染小鼠肺组织切片和肺部组织研磨液上清TfR1表达丰度进行检测,提取肺组织总RNA并进行TfR1基因qPCR验证.siRNA技术构建TfR1--RAW 264.7巨噬细胞系,以FITC标记的耻垢分枝杆菌(FITC-Mycobacterium smegmatis,FITC-M.smegmatis)和M.smegmatis进行巨噬细胞吞噬和杀伤功能实验,并通过流式细胞术和细菌培养菌落计数方法进行检测分析.结果 低剂量、中剂量和高剂量铁剂小鼠肺组织TfR1表达水平与阴性对照小鼠差异无统计学意义.M.tb感染后,铁过载M.tb感染小鼠和单纯M.tb感染小鼠肺组织TfR1表达均显著上调,且前者TfR1的表达丰度显著高于后者.下调RAW 264.7巨噬细胞TfR1表达水平后,TfR1-/-与TfR1+/+RAW 264.7巨噬细胞在1、2和4h吞噬FITC-M.smegmatis数量组间差异无统计学意义.M.smegmatis感染后24、48和72h后,TfR1-/-RAW 264.7巨噬细胞杀伤功能则明显优于TfR1+/+RAW 264.7巨噬细胞,胞内残余活M.smegmatis数量显著低于未转染的TfR1+/+正常细胞.结论 TfR1参与了M.tb的侵染,并可能与M.tb获取铁元素以利其在胞内生存有关;TfR1的下调不影响M.tb的入侵,但抑制其在巨噬细胞内的增殖.