大质粒转染人源心室肌Ac16细胞条件探究

• 作者: 李亚欢 范承昊 向晨莹 廉虹
• 来源期刊: 中国细胞生物学学报
• 关键词: Ac16细胞 转染 CasRx
• 年，卷（期）: 2022,（2）
• 所属期刊栏目: 技术与方法|TECHNIQUES & METHOD
• 页码范围: 299-305
• 页数: 7页
• 语种: 中文
• DOI: 10.11844/cjcb.2022.02.0009

摘要

该研究主要针对大质粒转染人源心室肌Ac16细胞的方式及最适条件进行摸索.采用人源心室肌Ac16细胞作为研究模型,分别用Lip3000转染、核酸脂质体(Hieff TransTM Liposomal)转染和慢病毒转染三种方法将外源大质粒pLenti-CasRx-EGFP导入Ac16细胞中,通过统计表达绿色荧光蛋白的阳性细胞比例,分析外源基因的转染效率,探索大质粒pLenti-CasRx-EGFP的最佳转染方式和转染条件.结果 表明,Lip3000转染Ac16细胞的最适转染条件为:质粒与Lip3000的比例为1∶2;核酸脂质体转染Ac16细胞的最适条件为:质粒与脂质体的比例为1∶3;慢病毒感染Ac16细胞的最适MOI值为200;通过比较三种转染方式的转染效率发现慢病毒的转染效率最高.最后得出大于10Kb的大型质粒(Lenti-CasRx-E FP)转染人源心室肌Ac16细胞最适合的方式是利用慢病毒转染,最佳MOI值为200.