枯草芽胞杆菌异戊二烯酶ComQ的生物信息学分析及对生物膜形态的影响

• 作者: 李伟 吴静 冯静静 汪剑 周梦洁 胡汶松 Sokhna mbacke Gningue 薛正莲 赵世光 钱森和 王洲 刘艳
• 来源期刊: 微生物学报
• 关键词: 枯草芽胞杆菌 生物信息学分析 生物膜 过表达 敲除
• 年，卷（期）: 2022,（2）
• 所属期刊栏目: 研究报告|RESEARCH ARTICLES
• 页码范围: 533-542
• 页数: 10页
• 语种: 中文
• DOI: 10.13343/j.cnki.wsxb.20210206

摘要

[目的]枯草芽胞杆菌ComQ是一种类异戊二烯生物合成酶.利用生物信息学预测分析了ComQ的生物学特性,对comQ基因进行过表达和敲除,构建突变菌,孔板发酵培养验证生物膜形态变化.[方法]运用NCBI (National Center for Biotechnology Information)网站里的Protein数据库获取ComQ蛋白氨基酸序列,通过在线生物信息学软件预测分析其生物学特征,包括其理化性质、信号肽、结构域、空间结构等.构建枯草芽胞杆菌BS168的comQ过表达及敲除菌株,利用孔板发酵培养验证生物膜生长性状.[结果]ComQ蛋白由299个氨基酸组成,理论相对分子质量约34204.08 Da,无信号肽,无跨膜区,为稳定胞内蛋白.通过菌落PCR,验证枯草芽胞杆菌BS168突变菌构建成功.利用孔板发酵培养枯草芽胞杆菌BS168及突变菌株,验证ComQ蛋白对枯草芽胞杆菌生物膜的形态形成存在影响.两种突变菌株生物膜形态均与原始菌株存在差异.[结论]通过对ComQ蛋白的基本性质、关键氨基酸位点及蛋白结构预测分析,构建突变菌株,验证生物膜形态变化,为后续探究ComQ对枯草芽胞杆菌的生长代谢变化奠定了基础.