AAV介导的RNAi对SARS-CoV-2S基因表达的抑制作用

• 作者: 刘晓玫 王东鑫 张春 魏双施
• 来源期刊: 生物技术通报
• 关键词: 新型冠状病毒 刺突蛋白 RNA干扰 腺相关病毒
• 年，卷（期）: 2022,（3）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 188-193
• 页数: 6页
• 语种: 中文
• DOI: 10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2021-0596

摘要

旨在研究AAV介导shRNA在体内、体外特异性抑制SARS-CoV-2S基因的表达,为抑制SARS-CoV-2感染提供参考.设计了 7条靶向SARS-CoV-2S基因的shRNA,分别构建了 shRNA1-7的质粒表达载体,与S基因表达载体共同转染体外培养细胞,通过qRT-PCR和Western blot分析其对S基因表达的抑制作用,筛选出抑制效率最高的shRNA1;构建包装表达shRNA1的重组腺相关病毒(rAAV)载体,将rAAV-shRNA1与S基因表达质粒共同转导293T细胞,S基因表达的抑制率为65.6％;两者通过滴鼻或肌肉注射方式共同转导小鼠,qRT-PCR检测其在体内对S基因表达的抑制率分别为36.8％和90.3％.