摘要:
目的:建立枳壳色谱指纹图谱定性、多组分定量与化学计量学的整合分析方法,评价不同产区、不同基原枳壳药材的质量属性与差异.方法:采用COSMOSIL 5C18-MS-Ⅱ色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相乙腈-0.2%磷酸水溶液梯度洗脱(0~4 min,19%A;4~5 min,19%~21%A;5~18 min,21%A;18~19 min,21%~28%A;19~27 min,28%A;27~28 min,28%~40%A;28~36 min,40%A;36~37 min,40%~50%A;37~42 min,50%~60%A;42~46 min,60%~95%A;46~55 min,95%~100%A),流速1 mL· min-1,柱温30 ℃,检测波长320 nm,进样量10 μL.建立不同产地、不同基原枳壳的高效液相色谱法(HPLC)指纹图谱,结合聚类分析(CA),主成分分析(PCA)和正交偏最小二乘法-判别分析(OPLS-DA)对26批枳壳进行质量评价.开发并验证了12个组分的含量测定分析方法,并基于样品含量差异对不同产地、不同基原的枳壳进行热图聚类分析.结果:指纹图谱及含量测定的方法学验证均良好,12批枳壳的指纹图谱相似度处于0.85~0.996,标定了20个共有峰,并归属了其中14个色谱峰;定量分析的12个成分分离度、线性关系均良好,加样回收率99.2%~101.0%,RSD均≤2.0%;CA,PCA与OPLS-DA显示,不同产地枳壳的区分度较大,不同品种间也存在差异.结论:基于同一色谱条件的指纹图谱定性与多指标成分定量分析操作方便、准确可靠,结合化学计量学手段可实现对不同产地、不同基原枳壳的判别归属与质量分析,可为其整体质量控制和评价提供参考.