不同增强剂对荧光PCR中尿素、血红素和胆酸盐抑制作用消除效果研究

• 作者: 刘文霞 王玮 林松洋 李振红
• 来源期刊: 检验医学
• 学科: 医学
• 关键词: 聚合酶链反应 增强剂 胆酸盐 尿素 血红素
• 年，卷（期）: 2022,（2）
• 所属期刊栏目: 临床应用研究?论著
• 页码范围: 155-158
• 页数: 4页
• 分类号: R446.1
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-8640.2022.02.012

摘要

目的 探讨不同聚合酶链反应(PCR)增强剂对胆酸盐、尿素和血红素抑制作用的消除效果.方法 将13种不同浓度的PCR增强剂[亚精胺、甲酰胺、PEG6000、NP40、Tween-20、甜菜碱、海藻糖、牛血清白蛋白(BSA)、明胶、硫酸铵、四甲基氯化铵(TMAC)、甘油、Triton X-100]加入含胆酸盐、尿素和血红素的扩增体系中,采用荧光PCR检测,根据循环阈值(Ct)分析不同PCR增强剂的抗抑制效果.结果 6.5 mmol/L亚精胺、20％甘油可消除6.98 mmol/L胆酸盐对PCR的抑制作用,6.5 mmol/L亚精胺、100 mmol/L硫酸铵、0.2 mol/L甜菜碱可消除0.99 mol/L尿素对PCR的抑制作用.300 mmol/L BSA、6.5 mmol/L亚精胺、20％PEG6000、50％甘油可消除6.98 mmol/L血红素对PCR的抑制作用.40％甲酰胺、10％NP40、40％Tween-20、1.5 mol/L海藻糖、2％明胶、200 mmol/L TMAC和20％Triton X-100均无法降低6.98 mmol/L胆酸盐、0.99 mol/L尿素和6.98 mmol/L血红素对PCR的抑制作用.结论 添加不同类型的PCR增强剂可有效提高荧光PCR的检测灵敏度和准确性.