ZNF451通过调控53BP1/MDC1促进A549和HeLa细胞DNA损伤修复

• 作者: 夏琪 赵国平 吴李君
• 来源期刊: 中华放射医学与防护杂志
• 关键词: ZNF451 DNA损伤修复 放疗敏感性 NHEJ 53BP1/MDC1
• 年，卷（期）: 2022,（4）
• 所属期刊栏目: 放射生物学
• 页码范围: 248-255
• 页数: 8页
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.cn112271-20211101-00435

摘要

目的:探究SUMO E3连接酶(zinc finger protein 451，ZNF451)介导非小细胞肺癌A549细胞和宫颈癌HeLa细胞DNA损伤修复的功能及机制。方法:采用γ射线或依托泊苷处理A549细胞和HeLa细胞，CCK-8法检测细胞增殖活力，蛋白免疫印迹法检测蛋白表达量。DR-GFP质粒系统检测DNA损伤修复水平，免疫荧光法检测蛋白的空间定位。结果:依托泊苷抑制了ZNF451的表达并呈剂量及时间依赖性。30、50、80 μmol/L依托泊苷处理，敲低ZNF451后的A549和HeLa细胞增殖活力显著降低(A549： t ＝ 27.62、25.61、5.32, P<0.01；HeLa： t ＝ 30.77、21.28、4.18， P<0.01)。ZNF451在DNA损伤位点处募集并与γ-H2AX存在胞内共定位和内源性的相互作用，且在30、50、80 μmol/L依托泊苷处理的ZNF451敲低细胞中，γ-H2AX的表达水平显著增加(A549： t ＝ 6.12、10.67、4.68， P<0.01；HeLa： t ＝ 7.94、9.81、15.12， P<0.01)。敲低ZNF451的细胞非同源末端连接(NHEJ)修复效率降低( t ＝ 18.60， P<0.05)。在辐射和依托泊苷处理后，ZNF451与P53结合蛋白1(53BP1)和DNA损伤检查点介质1(MDC1)有明显的共定位。 结论:敲低ZNF451抑制A549和HeLa细胞增殖并诱导DNA损伤水平加剧。ZNF451可以募集至DNA损伤位点，通过与DNA损伤修复因子53BP1/MDC1共定位参与NHEJ修复。