血必净通过高迁移率族蛋白1对热应激神经干细胞的保护作用研究

• 作者: 李红波 温敏勇 罗苑苑 郑述铭 张先进 李春河 曹蕊 王林
• 来源期刊: 广州中医药大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 血必净 热射病 热应激 脑保护 高迁移率族蛋白1 自噬 凋亡 神经干细胞
• 年，卷（期）: 2022,（1）
• 所属期刊栏目: 中药药理与质量
• 页码范围: 165-170
• 页数: 6页
• 分类号: R285.5
• 语种: 中文
• DOI: 10.13359/j.cnki.gzxbtcm.2022.01.028

摘要

[目的]探讨血必净通过高迁移率族蛋白1(HMGB1)对热应激神经干细胞的保护作用机制.[方法]以43℃热刺激60 min建立热应激大鼠脑神经干细胞模型.实验分为7组,即阴性对照组、热应激组、非热应激+血必净(浓度25％)组、热应激+血必净低剂量(浓度5％)组,热应激+血必净中剂量(浓度15％)组、热应激+血必净高剂量(浓度25％)组、热应激+HMGB1抑制剂组.采用细胞计数试剂盒8(CCK-8)检测细胞增殖能力;采用Ac-DEVD-pNA底物法检测细胞Caspase-3活性;采用蛋白免疫印迹法(Western Blot)检测自噬相关蛋白p62、微管相关蛋白轻链3(LC3)、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)及凋亡相关蛋白、Caspase-3表达水平;使用核蛋白/胞浆蛋白提取试剂盒提取细胞胞核、胞浆蛋白,Western Blot检测胞内及胞浆内HMGB1表达水平.[结果]选择热应激复温9 h时间点与血必净高剂量用于后续实验.与阴性对照组比较,热应激组细胞p62、LC3-up表达量降低,p-mTOR、LC3-bottom、HMGB1(胞浆)表达量增高(P<0.01);与热应激组比较,血必净处理组(热应激+高剂量血必净)p62、LC3-up、Caspase-3表达量进一步下降(P<0.01),p-mTOR、LC3-bottom、HMGB1(胞浆)的表达量进一步升高(P<0.01);与血必净处理组比较,HMGB1抑制剂处理组(热应激+HMGB1抑制剂)p62、p-mTOR、LC3、Caspase-3及HMGB1(胞浆)的表达量无显著性差异(P>0.05).[结论]血必净可通过促进HMGB1胞浆转位诱导自噬抑制热应激脑神经干细胞凋亡,从而发挥脑保护作用.