绵羊肺炎支原体云南分离株鉴定及其TU/HSP70基因特征分析

• 作者: 汤琳波 李富祥 邵庆勇 王金萍 樊月圆 高华峰
• 来源期刊: 中国动物检疫
• 学科: 农学
• 关键词: 绵羊肺炎支原体 分离鉴定 热休克蛋白基因 延伸因子 遗传特征
• 年，卷（期）: 2022,（2）
• 所属期刊栏目: 技术支撑
• 页码范围: 103-108,113
• 页数: 7页
• 分类号: S855
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-944X.2022.02.020

摘要

为探究2020年冬季云南省昆明市某山羊场持续发生的羊呼吸道疾病病因,从该场采集病料,经样品DNA提取、临床症状及病理剖检观察、病原分离纯化和16S rRNA PCR扩增鉴定,确定病原为绵羊肺炎支原体,并将分离株命名为YN-2020.随后设计引物,扩增YN-2020株延伸因子(TU)和热休克蛋白基因(HSP70)全长序列,分别与GenBank中相关参考菌株构建遗传进化树开展生物信息学分析,并对TU及HSP70基因进行体外原核表达.生物信息学分析结果显示:YN-2020分离株TU基因与绵羊肺炎支原体菌株MoGH3-3亲缘关系较近,在不同支原体种间,其与牛殊异支原体亲缘关系较近,与禽滑液囊支原体亲缘关系较远;HSP70基因与绵羊肺炎支原体Movi 117株亲缘关系较近,在不同支原体种间,其与牛殊异支原体亲缘关系较近,与猪鼻支原体亲缘关系较远.TU及HSP70基因原核表达结果显示,两种蛋白均能在大肠杆菌表达系统中获得不同程度的分泌性表达,TU重组蛋白大小约48 kDa,HSP70重组蛋白大小约68 kDa,且能与康复期绵羊血清发生反应.本研究可为进一步认识绵羊肺炎支原体提供参考,并在此基础上完善相关诊断方法的研究.