siRNA下调20S蛋白酶体β5亚基抑制立氏立克次体细胞内增殖

• 作者: 戴璐鹏 焦俊 付梦姣 赵明亮 张珊 于永慧 温博海 熊小路 周冬生 欧阳譞
• 来源期刊: 微生物学报
• 关键词: 小干扰RNA 立氏立克次体 PSMB5 蛋白酶体 感染免疫
• 年，卷（期）: 2022,（3）
• 所属期刊栏目: 研究报告|RESEARCH ARTICLES
• 页码范围: 1099-1109
• 页数: 11页
• 语种: 中文
• DOI: 10.13343/j.cnki.wsxb.20210406

摘要

[目的]探究宿主20S蛋白酶体β5亚基(proteasome 20S subunit beta 5,PSMB5)对革兰氏阴性专性胞内寄生菌立氏立克次体胞内生长繁殖的影响.[方法]利用小干扰RNA转染Vero和THP-1宿主细胞,设置未转染细胞为空白对照组、无义小干扰RNA转染组为阴性对照组、PSMB5特异性小干扰RNA转染组为实验组,采用SYBR定量PCR和蛋白印迹法评价宿主细胞PSMB5变化水平;随后利用立氏立克次体以感染复数为0.1感染转染后细胞系,采用光镜观察、荧光显微镜观察和PCR定量方法检测细菌胞内繁殖变化水平.[结果]与si-NC阴性对照和空白对照相比,si-PSMB5能够显著降低宿主细胞PSMB5mRNA转录水平和蛋白表水平;在随后立氏立克次体感染过程中,能够降低立氏立克次体的胞内细菌载量.[结论]下调宿主PSMB5基因表达能够抑制立氏立克次体胞内生长繁殖.