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中药复方敷和备化方对CD133+HepG2肝癌干细胞增殖及相关自噬蛋白影响的机制
中药复方敷和备化方对CD133+HepG2肝癌干细胞增殖及相关自噬蛋白影响的机制
作者:
李祖隆
荣震
孙华
蒋锐沅
钟晓婷
莫春梅
基本信息来源于合作网站,原文需代理用户跳转至来源网站获取
肝癌干细胞
敷和备化方
PI3K
AKT
mTOR
通路
LC3
自噬
摘要:
背景:肝癌干细胞是肝癌不断发生发展和高异质性产生的关键细胞,目前尚无针对肝癌干细胞相关自噬通路为靶点的中药复方研究,因此中药复方抑制肝癌干细胞自噬的研究十分具有必要性.目的:探讨中药复方制剂敷和备化方对CD133+HepG2肝癌干细胞PI3K/AKT/mTOR通路及相关自噬蛋白影响的机制.方法:免疫磁珠法分选出CD133+HepG2细胞,用体积分数为2%,4%,8%,16%敷和备化方含药血清作用CD133+HepG2细胞,CCK-8法检测细胞增殖活力,选出最佳干预体积分数的敷和备化方含药血清.将CD133+HepG2细胞分为血清对照组、空白对照组、雷帕霉素组和敷和备化方组,分别用含体积分数16%空白大鼠血清的DMEM/F12培养基、无血清DMEM/F12培养基、含0.05%雷帕霉素的DMEM/F12培养基、含体积分数16%敷和备化方含药血清的DMEM/F12培养基培养.流式细胞术检测各组CD133+HepG2肝癌干细胞百分比;RT-PCR法检测各组细胞中PI3K、AKT、mTOR、LC3-Ⅱ、Beclin-1的mRNA表达水平;Western blot法检测各组细胞中PI3K、p-AKT、AKT、p-mTOR、mTOR、LC3-Ⅱ的蛋白表达水平;免疫荧光法检测各组细胞中LC3、LC3-Ⅱ的表达水平.结果 与结论:①敷和备化方含药血清有抑制CD133+HepG2细胞增殖的作用,其中体积分数为16%敷和备化方含药血清干预72 h抑制作用最明显(P<0.05);②与血清对照组、空白对照组相比,敷和备化方组和雷帕霉素组CD133+HepG2细胞百分比下降(P<0.05),PI3K、AKT、p-mTOR、mTOR、LC3-Ⅱ的蛋白表达水平均明显下调(P<0.05);PI3K、AKT、mTOR、LC3-Ⅱ、Beclin-1的mRNA表达水平均明显下调(P<0.05);LC3、LC3-Ⅱ的荧光信号强度均明显下调(P<0.05);③与雷帕霉素组相比,敷和备化方组CD133+HepG2细胞中的PI3K、p-AKT、AKT、p-mTOR、mTOR、LC3-Ⅱ蛋白表达水平均明显下调(P<0.05),PI3K、AKT、mTOR、LC3-Ⅱ、Beclin-1的mRNA表达水平均明显下调(P<0.05),LC3、LC3-Ⅱ的荧光信号强度均明显下调(P<0.05);④结果表明,敷和备化方能抑制肝癌干细胞自噬和增殖,其机制与抑制PI3K/AKT/mTOR信号通路有关.
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篇名
中药复方敷和备化方对CD133+HepG2肝癌干细胞增殖及相关自噬蛋白影响的机制
来源期刊
中国组织工程研究
学科
医学
关键词
肝癌干细胞
敷和备化方
PI3K
AKT
mTOR
通路
LC3
自噬
年,卷(期)
2022,(31)
所属期刊栏目
肿瘤干细胞|Tumor stem cells
研究方向
页码范围
4988-4995
页数
8页
分类号
R459.9|R318|R285.5
字数
语种
中文
DOI
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研究主题发展历程
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肝癌干细胞
敷和备化方
PI3K
AKT
mTOR
通路
LC3
自噬
研究起点
研究来源
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研究去脉
引文网络交叉学科
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期刊影响力
中国组织工程研究
主办单位:
中国康复医学会
《中国组织工程研究与临床康复》杂志社
出版周期:
旬刊
ISSN:
2095-4344
CN:
21-1581/R
开本:
大16开
出版地:
沈阳浑南新区10002信箱
邮发代号:
8-584
创刊时间:
1997
语种:
chi
出版文献量(篇)
55677
总下载数(次)
80
总被引数(次)
337465
相关基金
国家自然科学基金
英文译名:
the National Natural Science Foundation of China
官方网址:
http://www.nsfc.gov.cn/
项目类型:
青年科学基金项目(面上项目)
学科类型:
数理科学
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