荧光PCR熔解曲线法在耐多药结核病诊治中的应用及分析

• 作者: 秦万 王明栋 欧维正 徐勇 贵阳市公共卫生救治中心检验科
• 来源期刊: 安徽医学
• 关键词: 熔解曲线法 微孔板法 耐多药结核病 耐药基因检测 药物筛选
• 年，卷（期）: 2024,（2）
• 所属期刊栏目: 临床医学
• 页码范围: 33-37
• 页数: 5页
• 语种: 中文

摘要

目的 探讨荧光聚合酶链反应（PCR）熔解曲线法在耐多药结核病（MDR-TB）的快速诊断和有效药物快速筛选中的应用价值。方法 以利福平（RFP）、异烟肼（INH）、乙胺丁醇（EMB）、氟喹诺酮类（FQs）为检测药物，应用熔解曲线法和微孔板药敏法，对比检测2021年1～7月贵阳市公共卫生救治中心罗氏固体培养阳性的84株菌株。两种方法药敏结果不一致的菌株用基因测序法作验证。结果 以微孔板法为标准，熔解曲线法对MDR-TB（微孔板诊断）的检出符合率、灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值和Kappa值依次为89.3%(75/84)、91.5%(43/47)、86.5%(32/37)、89.6%(43/48)、88.9%(32/36)、0.78。溶解曲线法对RFP、INH、EMB、FQs的检出符合率、灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值和Kappa值分别为76.2%～97.6%、86.7%～95.7%、73.9%～100%、41.9%～100%、94.1%～98.6%和0.45～0.95。对22份（26.19%,22/84）微孔板法敏感、熔解曲线法耐药的菌株进行测序验证，结果均显示含有耐药突变；而微孔板法耐药、熔解曲线法敏感的6份（0.71%,6/84）菌株在测序区域均为野生型。结论 荧光PCR熔解曲线法对微孔板药敏法检测结果的灵敏度、特异度、符合率、一致性均较高，可为耐多药结核病的初筛诊断及治疗方案制定提供实验室依据。