m6a甲基转移酶METTL3调控KAI1/CD82表达介导垂体 神经内分泌肿瘤细胞生物学行为的机制研究

• 作者: 郑锴 罗秀玲 张玮豪 刘宇利 李玉明 廖尚高
• 来源期刊: 天津医药
• 学科: 其他
• 关键词: 垂体肿瘤 神经内分泌瘤 甲基转移酶类 Kangai-1蛋白质 甲基化 m6a甲基转移酶 甲基转移酶样3
• 年，卷（期）: 2024,（8）
• 页码范围: 1-6
• 页数: 6页
• 语种: 中文
• DOI: 10.11958/20221753

摘要

目的 研究m6a甲基转移酶METTL3调控KAI1/CD82表达介导垂体神经内分泌肿瘤细胞增殖、迁移与侵袭的机制.方法 通过实时荧光聚合酶链反应(qPCR)和蛋白免疫印迹测定大鼠垂体细胞、大鼠垂体神经内分泌肿瘤细胞系GH3和MMQ中的METTL3与KAI1/CD82表达水平.体外培养GH3细胞,将其随机分为对照组、METTL3过表达质粒组、METTL3空质粒组、METTL3 siRNA组、METTL3 siRNA阴性对照组,经分组转染后,通过qPCR和蛋白免疫印迹检测各组细胞METTL3与KAI1/CD82表达;通过CCK-8实验检测各组细胞活力;通过细胞划痕、Transwell侵袭实验检测各组细胞迁移侵袭情况;通过甲基化RNA免疫共沉淀(MeRIP)实验检测各组细胞KAI1/CD82 m6A甲基化修饰情况.结果 相比大鼠垂体细胞,大鼠垂体神经内分泌肿瘤细胞系GH3及MMQ中的METTL3蛋白及mRNA表达水平明显升高,KAI1/CD82蛋白及mRNA表达水平明显降低(P＜0.05).与对照组相比,METTL3空质粒组、METTL3 siRNA阴性对照组细胞各指标差异无统计学意义;与对照组、METTL3空质粒组相比,METTL3过表达质粒组细胞活力、迁移距离、侵袭细胞数、METTL3蛋白及mRNA表达水平、KAI1/CD82 m6A甲基化水平升高(P＜0.05),KAI1/CD82蛋白及mRNA表达水平降低(P＜0.05);与对照组、METTL3 siRNA阴性对照组相比,METTL3 siRNA组细胞活力、迁移距离、侵袭细胞数、METTL3蛋白及mRNA表达水平、KAI1/CD82 m6A甲基化水平降低(P＜0.05),KAI1/CD82蛋白及mRNA表达水平升高(P＜0.05).结论 下调METTL3表达可降低KAI1/CD82 m6A甲基化水平,促进KAI1/CD82 mRNA转录表达,抑制垂体神经内分泌肿瘤细胞增殖、侵袭及迁移.