电针通过调节Notch3信号通路改善大脑中动脉闭塞小鼠海马神经元凋亡的作用机制

• 作者: 杨语晗 许明军 穆敬平 十堰市太和医院 湖北医药学院附属医院
• 来源期刊: 中西医结合心脑血管病杂志
• 关键词: 大脑中动脉闭塞 Notch3信号通路 电针 海马神经元 实验研究
• 年，卷（期）: 2024,（24）
• 所属期刊栏目: 基础医学论著/研究
• 页码范围: 66-71
• 页数: 6页
• 语种: 中文

摘要

目的:探讨电针通过调节Notch3信号通路改善大脑中动脉闭塞小鼠海马神经元凋亡的作用机制。方法:将45只健康无特定病原体(SPF)级雄性C57BL/6小鼠随机分为对照组、大脑中动脉闭塞模型(MCAO)组和电针治疗组，各15只。通过2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)染色和小鼠神经行为评分比较小鼠脑梗死神经损伤情况。采用免疫组织化学分析小鼠海马神经元Bax和Caspase-3蛋白表达。通过末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记(TUNEL)荧光染色分析小鼠神经元细胞凋亡率；通过实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-PCR)分析小鼠海马组织肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-1β、IL-6、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)mRNA表达；通过免疫组织化学分析小鼠海马神经元细胞凋亡；通过蛋白印迹分析小鼠海马组织Bax、Bcl-2、Caspase-3及H19/EZH2/Notch3蛋白表达。通过免疫荧光染色分析小鼠脊髓组织Nestin和神经胶质纤维酸性蛋白(GFAP)表达。结果:连续干预14 d后，MCAO组小鼠神经损伤和脑梗死体积较对照组增加(P<0.05),电针治疗组小鼠神经损伤和脑梗死体积较MCAO组减小(P<0.05)。MCAO组神经细胞凋亡率较对照组升高(P<0.05),电针治疗组神经元细胞凋亡率较MCAO组减少(P<0.05);MCAO组TNF-α、IL-1β、IL-6、iNOS mRNA表达较对照组升高(P<0.05),电针治疗组TNF-α、IL-1β、IL-6、iNOS mRNA表达较MCAO组降低(P<0.05)。MCAO组Bax和Caspase-3蛋白表达较对照组升高(P<0.05),电针治疗组Bax和Caspase-3蛋白表达较MCAO组降低(P<0.05),MCAO组Bcl-2蛋白表达较对照组降低(P<0.05),电针治疗组Bcl-2蛋白表达较MCAO组升高(P<0.05)。MCAO组H19、EZH2和Notch3蛋白表达较对照组升高(P<0.05),电针治疗组H19、EZH2和Notch3蛋白表达较MCAO组降低(P<0.05)。MCAO组Nestin蛋白表达较对照组降低(P<0.05),GFAP蛋白表达较对照组升高(P<0.05);电针治疗组Nestin蛋白表达较MCAO组升高(P<0.05),GFAP蛋白表达较MCAO组降低(P<0.05)。结论:MCAO可诱导海马神经元凋亡，电针通过调控Notch3激活，调节Bax/Bcl-2及Nestin和GFAP蛋白，从而阻断Caspase-3激活，抑制神经元凋亡。