猴樟 ＣｂｂＨＬＨ９６ 基因启动子克隆与表达

• 作者: 张丽华 韩浩章 赵荣 李素华 王芳 张楠 王晓立
• 来源期刊: 东北林业大学学报
• 学科: 农学
• 关键词: CbbHLH96基因启动子;表达分析;双荧光素酶报告基因技术;猴樟
• 年，卷（期）: 2025,（4）
• 页码范围: 23-29,46
• 页数: 8页
• 语种: 中文
• DOI: 10.13759/j.cnki.dlxb.2025.04.013

摘要

转录因子CbbHLH96参与猴樟响应碱胁迫过程，为弄清CbbHLH96参与植物耐碱胁迫的工作模式和信号传递途径，采用PCR技术克隆获得CbbHLH96基因5’端缺失型启动子片段，采用双荧光素酶报告基因技术分析外源茉莉酸甲酯、水杨酸和ABA处理后的启动子片段表达活性。研究表明：获得的CbbHLH96基因启动子片段长为1 976 bp;顺式作用元件分析发现CbbHLH96基因启动子片段中包含光响应调控元件、茉莉酸甲酯响应调控元件、ABA响应元件、乙烯响应元件、干旱诱导响应元件、赤霉素响应元件、防御和应激反应元件、水杨酸响应元件；采用双荧光素酶报告基因技术分析发现，bHLH96-Luc3、bHLH96-Luc4片段具备最高的启动子活性；BDGP在线软件的分析发现，CbbHLH96基因启动子序列的转录起始位点及可能的核心启动子区域应该在bHLH96-Luc4片段的1 593～1 643 bp位置；水杨酸和茉莉酸甲酯处理均抑制启动子片段bHLH96-Luc3、bHLH96-Luc4的表达活性，ABA处理则增加了启动子片段bHLH96-Luc3的表达活性，抑制了bHLH96-Luc4的表达活性。CbbHLH96基因启动子序列的活性区域在bHLH96-Luc3、bHLH96-Luc4片段，转录因子CbbHLH96功能受水杨酸和茉莉酸甲酯代谢的负向调控，受ABA代谢途径的正向调控。