摘要:

目的 探讨直接应用活菌苗在肠道内表达pCDR1 Th表位抗原诱导SLE口服免疫耐受的可行性.方法 以同系凋亡淋巴细胞免疫BALB/c小鼠制备SLE样症状小鼠模型,喂饲构建的重组SL7207菌株进行免疫耐受的诱导.观察血清ANA、ds-DNA和抗核小体抗体等自身抗体、白细胞、蛋白尿和肾脏损伤情况.结果 成功制备了SLE鼠模型.与阴性对照组相比,CTLA4-Ig-pCDR1能明显降低实验小鼠ANA、ds-DNA和抗核小体抗体等自身抗体的水平,对白细胞减少和蛋白尿有明显的改善作用,对肾脏损伤有明显的保护作用.结论 利用减毒鼠伤寒沙门菌携带pCDR1 Th表位诱导SLE的口服免疫耐受是可行的,这为口服诱导免疫耐受防治SLE提供了一个新的途径.

摘要:

为了探究减毒沙门菌递呈不同长度猪流行性腹泻病毒(PEDV)S基因的可行性,本研究对3株携带不同长度S基因片段的减毒鼠伤寒沙门菌进行了生物学特性评估.主要进行了对所构建的重组减毒沙门菌菌株SL7207(pVAX-S499-650)(长456 bp,编码S蛋白N末端499 650位氨基酸)、SL7207(pVAX-S499-789)(长873 bp,编码S蛋白N末端499-789位氨基酸)和前期构建的菌株SL7207(pVAXD-S1-789)(长2 367 bp,编码S蛋白N末端1-789位氨基酸)的生物学特性研究,包括生长曲线测定、携带质粒的体内/外稳定性、回肠组织内的转录、在小鼠体内动态增殖规律、小鼠口服的安全性等.结果表明:SL7207(pVAX-S499-650)、SL7207(pVAX-S499-789)、SL7207(pVAXD-S1789)3种口服菌株均具有较高的稳定性;携带的目的基因可在肠道组织内转录;菌株在小鼠肝、脾中增殖约5周后逐渐被机体清除;小鼠口服具有良好的安全性.本研究结果表明减毒鼠伤寒沙门菌SL7207可递呈不同长度的S基因抗原片段,为后续开展3种菌株的实际口服免疫效果比较研究奠定了基础.

摘要:

将从重组质粒pVAX1-HA中扩增的HA基因和从pVAX1-HA-CpG中切出的HA-CpG基因分别克隆入pcDNA3.1(+)载体中,获得重组质粒pcDNA3.1-HA和pcDNA3.1-HA-CpG.将上述重组质粒分别转染COS-7细胞,经间接免疫荧光试验检测发现HA基因可在COS-7细胞中表达.将重组质粒转入减毒鼠伤寒沙门菌SL7207,构建成携带DNA疫苗的重组沙门菌SL7207(pcDNA3.1-HA)和SL7207(pcDNA3.1-HA-CpG).将重组菌分别以5×109CFU口服免疫1日龄鸡2次,重组菌免疫组产生的小肠黏膜抗体效价与空载体组及油乳剂灭活疫苗组间存在显著差异.攻毒免疫保护结果表明,SL7207(pcDNA3.1-HA-CpG)免疫组与空载体组之间存在显著差异,而SL7207(pcDNA3.1-HA)免疫组则与空载体组间无显著差异,说明CpG可增强DNA疫苗的免疫效果.