摘要:

观察了卵丘细胞共培养对小鼠生发泡期部分裸露(PNO)和裸卵(NO)成熟和发育能力的影响;分别用小鼠、大鼠、猪的卵丘细胞与小鼠PNO和NO进行了共培养.检测了小鼠PNO和NO的减数分裂能力、生发泡构型、受精和胚胎发育能力.结果,PNO、NO的减数分裂能力显著(P＜0.05)低于卵丘完整复合体(COCs)的减数分裂能力.COCs中SN型卵母细胞比率显著高于PNO和NO中SN型卵母细胞比率(P＜0.05),大部分PNO和NO的卵母细胞核型为NSN型.与对照组相比,与小鼠或大鼠卵丘细胞共培养的小鼠PNO和NO的减数分裂能力没有显著提高,但是与猪卵丘细胞共培养却可以提高小鼠PNO和NO的减数分裂能力.结果表明,猪卵丘细胞能促进小鼠卵母细胞的体外成熟,但并不影响小鼠卵母细胞的受精和胚胎发育.

摘要:

本研究采用实时荧光定量PCR技术,从mRNA水平探讨了山羊卵丘卵母细胞复合体体外成熟(IVM)过程中(0、6、12、18、24和27 h)GDF9基因的相对表达变化,分析其与卵丘细胞扩散之间的关系.结果表明,GDF9mRNA在山羊卵丘卵母细胞复合体体外成熟过程中均有表达,且在成熟培养初期表达量较低,其表达峰值出现在IVM 12 h,与卵丘细胞开始扩散的时间一致,之后又有所下降.由此推测,GDF9基因在山羊卵丘扩散和卵母细胞体外成熟过程中起着重要的作用.

摘要:

旨在探讨牛卵丘卵母细胞复合体(Cumulus-oocyte complex,COCs)体外成熟过程中生长分化因子9(Growth differentiation factor 9,GDF-9)基因表达和卵丘细胞扩展的关系.运用实时荧光定量PCR技术检测GDF-9基因在牛卵丘卵母细胞复合体体外成熟过程中(0、6、12、18、24和28 h)的相对表达变化,同时观察了卵丘细胞扩展情况.结果表明,GDF-9 mRNA的表达量在牛卵丘卵母细胞复合体体外成熟过程中呈现一定的规律性变化,随着成熟培养的进行,其表达量逐渐增加,在成熟培养12h时表达量最高,但随后又逐渐降低,在成熟培养24 h表达量最低;卵丘细胞在IVM 12 h开始出现明显的扩散,而且随着成熟时间的延长,卵丘细胞的扩散程度在不断增加.研究结果表明:高水平的GDF-9 mRNA表达与卵丘细胞开始扩散的时间一致,揭示GDF9基因可能在牛卵丘细胞扩散和卵母细胞体外成熟过程中起着重要的作用.

摘要:

为探明生长分化因子-9(Growth differentiation factor 9,GDF-9)对牦牛卵丘一卵母细胞复合体(Cumulusoocyte complexes,COCs)体外培养的卵母细胞成熟率及相关基因mRNA表达水平的影响:采取健康牦牛的卵巢,分离COCs进行体外成熟培养;在牦牛COCs成熟培养液中添加终浓度分别为0、200、400、600 ng/mL的GDF-9,统计卵母细胞成熟率;采用Real-time PCR方法检测GDF-9处理的COCs中Smad信号通路下游分子Smad 4以及卵丘扩展相关基因(HAS2、PTX3、PTGS 2)的mRNA表达水平.结果表明:添加0、200、400、600 ng/mL GDF-9的COCs成熟率差异不显著(P＞0.05).Smad 4和卵丘扩展相关基因(HAS2、PTX 3、PTGS 2)的mRNA表达量随着GDF-9浓度升高呈上升趋势,其中600 ng/mL GDF-9处理组的Smad 4和PTX3 mRNA表达量最高,与其他处理组差异显著(P＜0.05);600 ng/mL GDF-9处理组的HAS2、PTGS 2 mRNA表达量与400 ng/mL GDF-9处理组差异不显著(P＞0.05),与其他实验组差异显著(P＜0.05).研究发现,在牦牛COCs体外培养过程中,添加不同浓度的GDF-9对牦牛卵母细胞成熟率的影响差异不显著;GDF-9显著提高其信号通路下游分子Smad 4基因以及卵丘细胞扩展相关基因(HAS 2、PTX 3、PTGS 2)的mRNA表达,说明600 ng/mL GDF-9对牦牛体外培养过程中卵丘扩展有作用,作用机制可能与激活Smad信号通路有关.