摘要:

目的：研究中药复方制剂丹柴合剂对树突状细胞（DCs）的诱导分化作用，并探讨其机制。方法制备丹柴合剂的大鼠含药血清。分离人外周血单个核细胞，经磁珠筛选出CD14+单核细胞，培养5~7 d获得未成熟树突状细胞（imDCs），分为空白血清组与含药血清组，空白血清组分别加入含或不含脂多糖（LPS）的大鼠空白血清，含药血清组分别加入含或不含LPS的大鼠含药血清。用流式细胞术检测DCs表面分子CD86、CD11b和人白细胞抗原（HLA）-DR的表达；用酶联免疫吸附试验（ELISA）法检测DCs分泌白细胞介素（IL）-10的水平；用流式细胞术检测DCs对T细胞增殖能力的影响；用实时定量PCR检测吲哚胺2，3双加氧酶（IDO）基因的表达。结果经丹柴合剂作用后，DCs高表达CD11b，低表达CD86与HLA-DR，IL-10分泌增加。且该制剂通过促进DCs表达IDO进而抑制DCs介导的T细胞增殖能力。结论丹柴合剂可诱导DCs分化为调节性树突状细胞（DCregs）并发挥免疫调节作用。

摘要:

目的:研究基因转染后高表达吲哚胺2,3-双加氧酶(IDO)的树突状细胞(DC)对T细胞增殖的抑制作用,以探讨其在器官移植中排斥反应的作用.方法:采用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)从腹膜炎小鼠的小肠组织中获取IDO全长cDNA片段,将其克隆至真核表达质粒pTracer中.构建真核表达质粒IDO-pTracer,随后用LipofectamineTM 2000介导转染小鼠脾脏DC,分为未转染组、空载体转染组、IDO基因转染组和IDO基因转染并添加1-甲基色氨酸(1-MT)组,以混合淋巴细胞反应的方法检测转染后DC对同种异系T细胞增殖的作用.结果:克隆的小鼠IDO基因全长cDNA大小约1.3 kb,无碱摹突变,以构建的重组真核表达质粒IDO-pTracer转染DC后,混合淋巴细胞反应结果显示IDO基因转染组的刺激指数(SI)低于未转染组、空载体转染组及IDO基因转染并添加1-MT组,差异均有统计学意义(P<0.05).结论:成功构建了IDO基因的真核表达载体IDO-pTracer,且IDO基因转染DC具有抑制异系T细胞增殖的作用.

摘要:

目的 探讨吲哚胺2,3双加氧酶(IDO)在肝癌组织及其引流区域淋巴结(TDLN)中表达的相互关系并分析其临床意义.方法 收集1999年1月-2007年11月在中山大学肿瘤防冶中心肝胆科行肝癌切除及淋巴清扫,术后经病理检查证实为肝细胞性肝癌,且淋巴结阴性的患者93例.所有患者随访至2008年8月.采用免疫组织化学法榆测肿瘤组织及TDLN中IDO的表达,并分析其表达与肝癌临床病理特征及预后的关系.结果 在肝癌组织中,IDO主要在肿瘤细胞胞质中表达;20例IDO高表达者1、3年生存率为76.5%、38.7%,73例IDO低表达者1、3年生存率为86.2%、71.2%,差异有统计学意义(P=0.028).在无转移癌的TDLN中,IDO阳性细胞在皮质淋巴窦区、皮质滤泡间区、副皮质区以及髓质区内成簇分布,其表达与肿瘤组织IDO表达无相关性.35例TNLN中IDO高表达者1、3年生存率分别是73.8%、41.9%,58例TDLN中IDO低表达者1、3年生存率分别为89.0%、69.9%,差异有统计学意义(P=0.019).Cox风险比例回归模型分析显示TDLN中的IDO表达是影响患者预后的独立因素.结论 IDO在TDLN中表达,与肝癌组织IDO表达无相关性,是影响患者预后判断的一个独立因素.

摘要:

目的 研究丁酸钠(NaB)抑制鼻咽癌细胞CNE2吲哚胺-吡咯2,3-双加氧酶(IDO)表达从而解除肿瘤免疫耐受的分子机制.方法 体外培养人鼻咽癌上皮细胞CNE2,采用NaB和(或)IFN-γ处理CNE2细胞;免疫印迹检测CNE2细胞IDO的表达情况;RT-PCR检测JAK/STAT的细胞因子信号抑制因子1(SOCS1)和SOCS3的转录水平;Real time PCR 检测CNE2细胞干扰素调节因子-1(IRF-1)的转录情况.结果 在NaB作用下,CNE2细胞内IDO的表达减少,并且IFN-γ诱导的IDO表达也被显著抑制;SOCS1和SOCS3的转录水平未见改变;而IFN-γ诱导的IRF1转录受到NaB的显著抑制.结论 NaB抑制IFN-γ诱导的IDO表达,不是通过增加SOCS1和SOCS3的转录,而可能是通过下调IRF-1,抑制IFN-γ诱导的IDO表达.