摘要:

目的 研究多重耐药鲍曼不动杆菌外排泵adeB基因表达量与亚胺培南耐药性的关系,探讨外排泵抑制剂对亚胺培南敏感性的影响,为外排泵及外排泵抑制剂在鲍曼不动杆菌亚胺培南耐药性中的作用提供理论依据.方法 筛选临床分离多重耐药鲍曼不动杆菌79株,采用PCR法检测adeB基因表达情况,RT-PCR方法对adeB基因进行转录水平测定,并比较亚胺培南敏感及耐药组基因转录表达量有无差异;采用微量肉汤稀释法检测加入外排泵抑制剂PAβN、奥美拉唑前后adeB阳性及阴性组多重耐药菌对亚胺培南MIC值的变化.结果 79株多重耐药鲍曼不动杆菌中,adeB基因在亚胺培南敏感组及耐药组表达量存在差异.PAβN对adeB阳性组亚胺培南耐药性降低有统计学意义,对adeB阴性组无明显影响;奥美拉唑对adeB阳性组及阴性组亚胺培南耐药性降低均无统计学意义.结论 鲍曼不动杆菌亚胺培南耐药性与adeB基因高表达有关.PAβN降低adeB阳性组多重耐药鲍曼不动杆菌亚胺培南耐药性,提高亚胺培南敏感性,对adeB阴性组无明显影响;奥美拉唑对亚胺培南耐药性无明显影响.

摘要:

铜绿假单胞菌作为一种机会致病菌,对多种临床常用抗生素呈现明显的固有与获得性耐药,这种多重耐药性的形成机制在于该菌具有的多种能量依赖性的药物主动外排泵和低通透性外膜屏障协同作用所致.近10年对铜绿假单胞菌药物外排泵的研究已经颇为深入,本文对有关进展予以讨论.在铜绿假单胞菌已报道了6种属于"耐药-生节-分裂(RND)"类的药物外排泵系统,它们可在天然野生株表达或者由于基因突变而诱导表达,从而介导了对β-内酰胺类(包括β-内酰胺酶抑制剂)、氨基糖苷类、氟喹诺酮类、大环内酯类及四环素类等的耐药性.这些外排泵中尤其以MexAB-OprM系统的作用底物范围最广,在耐药性形成中起主要作用.RND类外排泵系统也普遍存在于其它革兰氏阴性细菌.各外排泵通常由内膜转运体蛋白、内膜融合蛋白及外膜通道蛋白一起形成功能性转运复合体将药物排至胞外.药物外排泵常影响对灭活酶较稳定的抗菌药物.一些新抗菌药物如Linezolid(Oxazolidinoes类)、Telithromycin(Ketolides类)及Tigecycline(Glycyclines类)也是MexAB-OprM等RND类外排泵的作用底物,故这些药物抗革兰氏阳性细菌的活性较强.铜绿假单胞菌外排泵表达的调控机制多是在转录水平上受局部阻遏物或激活物的作用.这些局部调节子的基因突变能导致外排泵活性增强,并常见于应用抗生素或其它抗菌消毒制剂后从临床分离的或实验室筛选的多重耐药铜绿假单胞菌.这些耐药菌的形成再次说明合理限制抗菌药物应用的必要性.外排泵系统还与其它耐药机制如细菌的药物作用靶位改变或产生药物灭活酶等一起发挥明显的协同作用,使细菌的耐药程度进一步地增高.现已研制了针对铜绿假单胞菌等细菌的外排泵抑制剂.应用外排泵抑制剂可阻断药物外排泵这一耐药机制,以维护或提高抗菌药物的抗菌活性,如外排泵抑制剂在体外和动物感染模型均被证实明显增强了氟喹诺酮类对铜绿假单胞菌敏感株和耐药株的抗菌活性,并降低了耐药菌的发生率.外排泵抑制剂尚处于临床前的基础实验研制阶段.

摘要:

综述了近年来抗菌药研究进展.全文分三个部分.在第一部分中叙述了头孢菌素、碳青霉烯、青霉烯、氨基糖苷、大环内脂、四环素和抗MRSA、PRSP、VRE等革兰氏阳性耐药菌的抗生素研究进展.第二部分介绍喹诺酮类、噁唑酮类与其他新合成抗菌药研究概况.最后评述了值得注意的研究动向:近年来,为了治疗需要,除致力于筛选对耐药菌有效的、具有新抗菌谱、新作用机制、新作用靶位的抗菌药外,还注意寻找提高与保护抗菌药物效能的物质,如抗生素增强剂、抗生素灭活酶抑制剂、渗透性促进剂、外排泵抑制剂等.并努力探索增强机体防御机能与阻断微生物感染途径与衰减病原性的物质.

摘要:

目的 检测4种外排泵抑制剂对5种抗菌药物耐药的影响,了解主动外排泵耐药机制在鲍曼不动杆菌菌株中的作用,为外排泵抑制剂的开发和鲍曼不动杆菌感染的治疗提供实验室数据.方法 临床收集鲍曼不动杆菌116株,采用琼脂平皿二倍稀释法测定5种抗菌药物对实验菌株的最低抑菌浓度(MIC),同批测定加入外排泵抑制剂后抗菌药物的MIC值.结果 庆大霉素加羰基氰氯苯腙(cCCp)后显示出外排阳性的菌株数量最多,有87株(75％)；其他显示外排阳性菌株的数量分别为:利血平+氯霉素(46.6％),奥美拉唑+氯霉素(33.6％),维拉帕米+庆大霉素(17.2％).外排泵抑制剂对头孢唑林的耐药性无影响.结论 4种所用外排泵抑制剂可不同程度逆转鲍曼不动杆菌的耐药,以CCCP筛选外排阳性菌效果最佳.当存在明显的酶水解耐药机制时,外排泵抑制剂对耐药性无影响.

摘要:

目的 研究解放军总医院临床分离的多重耐药铜绿假单胞菌的主动外排系统,为指导临床合理选择抗生素提供依据.方法 采用外排泵抑制剂(苯丙氨酸-精氨酸-β萘酰胺)与喹诺酮类抗生素,以微量肉汤稀释法测定加与不加外排泵抑制剂时环丙沙星与左氧氟沙星的最低抑菌浓度(MIC)值,并计算MIC值的变化,根据加与不加外排泵抑制剂MIC值降低3个稀释度及以上筛选主动外排表型阳性菌株;PCR扩增外排表型阳性菌的耐药基因oprM、mexB和mexR,并对3株菌进行mexR基因测序分析;RT-PCR检测oprM基因的mRNA水平,分析耐药基因的表达情况.结果 苯丙氨酸-精氨酸-β萘酰胺能极大的降低左氧氟沙星和环丙沙星的MIC值,70株多重耐药铜绿假单胞菌中46株表型阳性(65.7%),其中PCR检测oprM、mexB和mexR基因同时阳性菌株42株(91.3%),仅oprM基因阳性2株(4.3%),oprM、mexB和mexR基因均阴性2株(4.3%).RT-PCR产物测定A值(A260/A280)与PAO1对照阳性菌株13株,以PAO1的oprM/rpoD的A值为对照阳性菌株4株,同时满足A值(A260/A280)和oprM/rpoD比值均高于PAO1的菌株3株.测序结果与GenBank中已知的mexR基因比对,其中2株同源性为100%,1株第434位核苷酸插入2bp(AT).结论 中国人民解放军总医院多重耐药铜绿假单胞菌大多存在主动外排的耐药机制,其耐药与外排泵过度表达相关.

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目的 在体外探讨美罗培南、头孢他啶、阿米卡星和环丙沙星4种抗菌药物分别与铜绿假单胞菌主动外排泵抑制剂奥美拉唑联合应用,是否有利于减少其耐药突变体的出现.方法 分别应用微量稀释法测定4种抗菌药物对铜绿假单胞菌的最低抑菌浓度(MIC),棋盘格法测定药物联合后的MIC,琼脂平板二倍稀释法测定抗菌药物单药以及联合后防耐药突变浓度的MPC,并计算相应的选择指数(SI,MPC/MIC),根据SI下降的程度来判断减少耐药突变体的能力.同时用美罗培南、头孢他啶、环丙沙星分别联合阿米卡星,阿米卡星联合环丙沙星,分别测定联合前后的SI,比较联合抗菌药物与联合奥美拉唑在防铜绿假单胞菌耐药突变的能力.结果 美罗培南、头孢他啶、阿米卡星、环丙沙星单独应用对铜绿假单胞菌SI分别为＞32,＞32,16,16,与奥美拉唑联合后SI分别为16,32,16,8.美罗培南、头孢他啶、环丙沙星分别与阿米卡星联合后的SI分别为4,4,8.阿米卡星与环丙沙星联合后阿米卡星的SI为4.结论 美罗培南、头孢他啶、环丙沙星分别与奥美拉唑联用时,可以缩小单药应用时对铜绿假单胞菌突变选择窗,有利于减少耐药突变体的产生,但防耐药突变作用弱于联合阿米卡星.阿米卡星与奥美拉唑联合不能缩小单药的SI,与环丙沙星联合能降低阿米卡星的SI.

摘要:

由于多药耐药致病菌的出现,越来越多的抗菌药物对这些病原微生物无效.因此,当务之急就是要用创新的方法研发抗多药耐药致病菌的药物,以控制病原微生物的感染.目前,多药外排系统(MES)已成为抗菌药物发挥最佳疗效的一大障碍.因此,小分子外排系统阻滞剂的发现是当下较为热门以及广泛的研究领域,其中包括天然界来源的外排泵抑制剂的研究,天然的化学型外排泵抑制剂的研究方法以及数量正日益增长.本文对革兰阳性菌、革兰阴性菌、分枝杆菌以及真菌中的多药外排系统进行了介绍,为寻找潜在的外排泵抑制剂奠定基础.

摘要:

主动外排是铜绿假单胞菌耐药的重要机制,在众多的主动外排系统中,以RND型最为常见.通过总结近年来发表的文献,现对铜绿假单胞菌RND型外排系统的结构、底物、流行病学、抑制主动外排等方面进行综述.

摘要:

近几年,多重耐药性铜绿假单胞菌(MDRP)引起院内耐药菌株的突发性蔓延,而备受人们的关注.综观世界抗菌药物的开发状况,针对这些耐药菌株的新型抗菌药物的研究与开发迫在眉睫.2006年日本抗生素学术研讨会奖励奖的颁奖演讲记录报告了日本长崎大学医学系附属医院对用作新型抗感染药物的外排泵抑制剂的研究开发现状,并就铜绿假单胞菌的临床重要性、金属β-内酰胺酶铜绿假单胞菌和多重耐药性铜绿假单胞菌,铜绿假单胞菌的病原性、长崎大学对耐药性铜绿假单胞菌的对策以及今后的展望等方面进行综述.

摘要:

细菌耐药性,尤其是多重耐药问题日益严重,给临床治疗带来极大的困难.而细菌外排机制是细菌产生多重耐药的重要机制之一.本文对细菌外排泵系统的组成、种类和几种常见耐药病原菌(包括大肠埃希菌、铜绿假单胞菌和金葡菌)中的主要外排泵,以及外排泵抑制剂的研究进展作简要综述.